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2024年3月11日发(作者：mybatis中自动映射级别)

TBST缓冲液配制及使用方法

1.材料准备

- 10×TBST缓冲液：10倍浓缩的Tween-TBS缓冲液，可以购买现成

的或根据配方自制。

-纯水：去离子水或超纯水。

- Tween-20：一种非离子表面活性剂，用于减小蛋白质与试管内表面

的非特异性吸附。

2.计算配制量

-计算需要的TBST缓冲液总体积，根据实验需求决定，通常在100mL

到1L之间。

-计算所需的10×TBST缓冲液的体积。

3.配制缓冲液

- 按照10×TBST缓冲液中Tween-TBS和纯水的比例来计算Tween-

TBS和纯水的体积。

- 将计算得出的所需体积的Tween-TBS缓冲液加入容器中。

-加入等量的纯水，搅拌均匀。

4.调整pH值（如果需要）

-使用pH计检测缓冲液的pH值。

-如有必要，可使用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）来调节pH值，

直至达到所需的范围。

5.储存缓冲液

-将配制好的TBST缓冲液分装到小容器中，标注好日期和成分。

-在4℃储存。

1.实验准备

-准备含有蛋白质的样品及所需试管或膜。

-加载样品前，可以使用TBST缓冲液对膜进行预洗。

2.膜的洗涤

-将膜置于一个容器中，加入足够的TBST缓冲液来完全浸泡膜。

-建议使用摇床、旋转器或烧杯辊转器进行洗涤，方法可根据实验需

求来选择。

-进行洗涤的时间和次数可以根据实验需求进行调整，通常洗涤3次，

每次5分钟。

3.洗涤液的丢弃

-将洗涤液倒入废液容器中，避免直接排入下水道。

4.试管的洗涤

-将试管置于容器中，加入足够的TBST缓冲液来完全浸没试管。

-摇动容器，将TBST缓冲液彻底洗涤试管表面。

5.使用洗涤后的试管

-待试管干燥后，可以进行进一步的实验步骤，如添加试剂或继续处

理样品。

关于TBST缓冲液的注意事项：

1. 在配制TBST缓冲液时，严格按照配方比例来计算Tween-TBS和纯

水的体积，以确保溶液浓度的准确性。

2.制备好的缓冲液应避免与污染物接触，如灰尘、细菌等。使用前可

通过滤器进行过滤以去除杂质。

值的调节需根据实验需求进行，通常在7.4左右。

缓冲液储存时应密封，避免蒸发和污染。

5.在膜的洗涤过程中，避免使用过于高效的洗涤步骤，以免洗去目标

蛋白质。

6.在试管的洗涤过程中，避免试管碰撞或刮伤试管表面，以免影响实

验结果。

以上是TBST缓冲液的配制和使用方法的简要介绍，希望能对您有所

帮助。


本文标签： 缓冲液 试管 使用 避免 容器

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