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2024年3月28日发(作者：powershell快捷键打开)
Thermo Accela UPLC
工作原理及使用说明
仪器特点
型 号：Accela 制造厂商：Thermo，美国
主要技术指标：流速范围：0.001～1ml/min、 压力：操作压力为0～15000bar
检测器:二极管阵列检测器、 波长范围:190～800nm
高效液相色谱的基本原理：
PUMP
Detector
W
Data station
or Collection
液相色谱工作流程图
由流程图可以看出系统由流动相、高压泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几
部分组成。流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色
谱柱(固定相)内。由于样品溶液中的各组分在色谱柱中的淋洗液和固定相间两相中具有
不同的分配系数，在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组
分在移动速度上产生较大的差别，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱进
入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰。
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高效液相色谱仪的应用
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范
围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及
各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，
使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂体系中的微量成分。
UPLC应用特点：
UPLC（ultra performance liquid chromatography）,除了具备和常规HPLC类似的
分析特点外，由于可承受高压力，可使用细粒径液相色谱柱，因此在分离度和分离速度
上具有较大优势，同时可以减少溶剂的使用量。但因此也对溶剂及样品预处理及仪器的
使用和维护有更高的要求。
操作规程
一、准备工作
1．查阅文献，获得目标分析物质或相近物质的液相色谱分离条件。
2．检查线路是否连接完好。检查流动相、洗针液是否充足，不足则根据要求添加。
3．有机流动相必须为进口HPLC级，水相可使用Millipore纯水机出水或娃哈哈屈臣氏
纯净水。所有流动相在使用前均需用0.2μm的滤膜过滤（水和缓冲液用水相滤膜,有机
相用有机相滤膜），其中水相需每天更换以保持新鲜。
4．标样和样品在使用前必须用0.2μm的针头式滤器（进口非分装）过滤。
5．将样品放置在样品托盘上，并记录相应的位置。且第一个和最后一个样品为不含营养
盐的流动相，用于清洗进样系统及管路。
二、开机
1．打开稳压电源（指针指示220V），打开仪器面板Accela AS、Accela PDA、Accela Pump
电源开关。
2．打开电脑，双击工作软件Xcalibur，在status状态栏下看到AS、PDA、Pump三项显
示ready to download；仪器面板灯除Pump部分的RUN灯呈橙色外，其余灯均为绿色，
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