黄秦艽对ANIT_诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤保护研究

第 42 卷第 3 期

2023年 5 月

Journal of South-Central Minzu University（Natural Science Edition）

中南民族大学学报（自然科学版）

Vol.42 No.3

May 2023

黄秦艽对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性

肝损伤保护研究

张志豪

1

，陈晓

2

，陈湘

1

，黄先菊

1

，李竣

1

，武宙阳

1, 3*

（1 中南民族大学 药学院， 武汉 430074； 2 湖北药昇中药科技有限公司，枣阳 4412002； 3 华中科技大学

同济医学院附属协和医院 武汉 430022）

摘要 为了探讨黄秦艽水提物（WVBF）对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤保护作用及机制研究，将雄性

C57BL/6小鼠50只随机分为5组，即正常组（NC）、模型组（MC）、阳性对照熊去氧胆酸组（UDCA 45 mg/kg）、WVBF低

（75 mg/kg）一次性灌胃造模，采集血液和肝脏样品测定血生化、肝脏病理以及FXR/SHP通路相关基因水平. 结果显

剂量组（WVBF 25 mg/kg）和WVBF高剂量组（WVBF 50 mg/kg）. 灌胃给予WVBF，连续10 d，在第7天用ANIT油溶液

示：与模型组相比，WVBF给药组小鼠肝脏坏死情况明显好转，炎性细胞浸润减少，血清中ALT、AST、TBA、T-Bil-V

和D-Bil-V明显下降，肝脏中Fxr、Shp、Mpr2和Bsep mRNA的水平显著上调，WVBF（50 mg/kg）组Ntcp的mRNA水平

显著下调（P<0.05）. 这表明黄秦艽对 ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤具有保护作用，其机制可能与调节胆汁酸

的合成、分泌、转运和重吸收有关.

关键词 黄秦艽；胆汁淤积性肝损伤；胆汁酸平衡；小鼠

中图分类号 R282.71 文献标志码 A 文章编号 1672-4321（2023）03-0306-07

doi：10.20056/.20230303

Protective effect and mechanism of Veratrilla baillonill Franch on ANIT

induced cholestatic liver injury in mice

（1 School of Pharmaceutical Sciences，South-Central Minzu University，Wuhan 430074， China； 2 Hubei Yaosheng

Union Hospital， Tongji Medical College， Huazhong University of Science and Technology， Wuhan 430022， China）

Abstract To investigate the protective effect and mechanism of water extract of Veratrilla baillonill Franch （WVBF） on

mouse cholestatic liver injury induced by ANIT， a total of 50 male C57BL/6 mice were randomly divided into 5 groups

according to body weight： normal group （NC）， model group （MC）， positive control group treated with ursodeoxycholic acid

Traditional Chinese Medicine Technology ， Zaoyang， 441200， China； 3 Department of Anesthesiology，

ZHANG Zhihao

1

，CHEN Xiao

2

，CHEN Xiang

1

，HUANG Xianju

1

，LI Jun

1

，WU Zhouyang

1, 3*

（UDCA 45 mg/kg）， low dose of WVBF group （WVBF 25 mg/kg） and high dose of WVBF group （WVBF 50 mg/kg）. WVBF was

given by gavage once a day for 10 days. On the seventh day， the model was made by gavage with ANIT oil solution （75 mg/kg）.

Blood and liver samples were collected to detect the serum biochemistry， liver pathology and FXR / SHP pathway related

TBA， T-BIL-V and D-BIL-V in serum significantly decreased， the mRNA levels of Fxr， Shp， Mpr2 and Bsep in liver were

its mechanism may relate to the regulation of bile acid synthesis， secretion， transport and re-absorption.

Keywords Veratrilla baillonill Franch； cholestatic liver injury； bile acid balance； mice

收稿日期 2022-07-03

*

通信作者 武宙阳（1976-），男，副主任医师，医学博士，研究方向：药物临床评估和治疗，E-mail：****************

基金项目 国家自然科学基金资助项目（81873090）；湖北省支持企业技术创新发展资助项目（科技型中小企业）

（2021BLB174）；襄阳市研究与开发资助项目（2021ABS003078）

genes. The results showed that compared with the model group， the liver necrosis， inflammatory cell infiltration， ALT， AST，

significantly increased， and the mRNA level of Ntcp in WVBF （50 mg/kg） group significantly decreased （P<0.05）. The

results suggest that Veratrilla baillonill Franch has a protective effect on ANIT induced cholestatic liver injury in mice， and

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第 3 期

张志豪，等：黄秦艽对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤保护研究

307

胆汁淤积是指肝内外各种原因引起胆汁形成、分

泌和排泄障碍，导致胆汁不能正常流入十二指肠而逆

流回血液循环的一种病理状态.胆汁淤积性肝损伤

（cholestatic liver injury， CHI）由肝内胆汁酸代谢异常

和有毒胆汁酸在肝内蓄积及氧化应激和炎症反应等

信号被激活，导致的肝脏和胆管实质细胞死亡

［1］

.

胆汁酸蓄积引起的炎症和肝损伤的详细机制

2）g. 购于华中农业大学实验动物中心，实验动物生

产许可证编号：SCXK-（鄂）2020-0019，实验单位使

用许可证编号：SCXK（鄂）2021-0089.动物饲养严格

遵循中南民族大学动物伦理委员会规定和国际NIH

准则，饲养于中南民族大学实验动物中心SPF动物

房.自由进食饮水，饲养室温度在20~25 ℃范围，相

对湿度（50±5）%，每日光照12 h.适应性喂养1周.

黄秦艽（Veratrilla baillonii Franch，中国云南省

大理草药有限公司，批号：S20140710）药材经中南

民族大学大学刘新桥博士鉴定为黄秦艽，凭证标

本（标本编号HSN13098）存放在药学院的植物标

本室，黄秦艽的花、茎、叶及干燥根如图1所示.黄秦

艽水提物（water extract of Veratrilla baillonill Franch，

WVBF）按相关文献

［7］

所述方法制备.黄秦艽根药材

杯中，以8倍蒸馏水浸泡过夜，于75 ℃加热煎煮提

取，重复3次，每次3 h，4000 r/min离心10 min，合并

提取液，在60 ℃旋转蒸发浓缩至浸膏，置真空冷冻

干燥器中冻干72 h.将提取粉末保存于干燥器中，临

用前以蒸馏水稀释至指定浓度使用.

粉碎后经40号筛，4.2 kg粗粉分批次置于多个大烧

仍不清楚.熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid，UDCA）、

乙酰胆酸和糖皮质激素被认为是治疗淤胆型肝炎

的有效药物，但其疗效和成本都不令人满意.

Franch，又名滇黄芩、丽江金不换、大苦参、黄龙胆等.

在临床上主要用于治疗肺热咳嗽、阿米巴痢疾、黄疸

型肝炎和蛔虫病

［2］

.黄秦艽的化学成分主要包括黄酮

类、环烯醚萜苷类和其他化合物，其中的环烯醚萜苷

类成分具有保肝、抑菌、抗炎和抗病毒等方面作用.

研究表明，黄秦艽中丰富的环烯醚萜苷类成分龙胆

苦苷、獐芽菜苷和獐芽菜苦苷，具有抗肝毒性和保肝

作用

［3］

，而且前期研究证实了其主要的生物活性化合

物龙胆苦苷和獐芽菜苷激活胰岛素信号转导通路，

参与肝脏代谢

［4］

.黄秦艽具有清肝利胆的功效，在少

数民族地区常用于黄疸型肝炎等疾病

［5］

.实验室前期

肝脏损伤

［6］

.

龙胆科黄秦艽属植物黄秦艽Veratrilla baillonill

其干燥块根入药，具有清热解毒、消炎杀虫等功效，

已经证实黄秦艽可以缓解2型糖尿病大小鼠所致的

寻找治疗CHI靶点及相关药物一直是近年来研

究的热点.法尼醇X受体（farnesoid X receptor，FXR）

是参与调节胆汁酸形成、转运和解毒过程中的主要

受体.它的主要功能是限制肝细胞胆汁酸过载，通

过调节蛋白酪氨酸磷酸酶（SHP）抑制肝中的胆固醇

7-α羟化酶（介导胆固醇转化为胆汁酸的限速酶）的

图1 黄秦艽的花、茎、叶及干燥根

Fig. 1　Flowers， stems， leaves and dried roots of

Veratrilla baillonii Franch

合成，故FXR可以作为治疗CHI的理想靶标.随着

中医药的不断发展，使用中草药和提取物已成为预

防和治疗CHI的一种趋势.

为进一步探讨黄秦艽保肝作用的临床适应

症及作用机制，本研究拟采用α-萘异硫氰酸酯

（α-naphthalene isothiocyanate，ANIT）一次性口服诱

导的小鼠胆汁淤积性肝损伤模型，探讨黄秦艽对

CHI小鼠肝脏的保护作用.

文中高效液相色谱法（HPLC）对黄秦艽的多种

成分表征所用的1-羟基-2，3，4-三甲氧基-7-O-β-D-吡

喃葡萄糖基酮等化合物皆为实验室自制.

ANIT、橄榄油（上海阿拉丁）；UDCA（上海源叶）；

多聚甲醛（国药集团）；丙氨酸氨基转移酶（alanine

transferase，AST）、总胆汁酸（total bile acid，TBA）、总

bilirubin，D-Bil-V）均购于深圳迈瑞生物；Trizol试剂

克）；荧光定量试剂盒（大连宝生物）.

aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸转移酶（aspartate

胆红素（total bilirubin，T-Bil-V）和直接胆红素（direct

盒（北京天根生化）；逆转录试剂盒（武汉爱博泰

1　材料与方法

1.1　材料、 试剂与仪器

C57BL/6雄性小鼠共50只，6周龄，体质量（20±

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308

中南民族大学学报（自然科学版）

第 42 卷

管中，吸取橄榄油10 mL加入，超声溶解混匀，配成

ANIT（7.5 mg/mL）油溶液，备用.

ANIT油溶液配置：称取75 mg ANIT加于离心

的水平均使用全自动生化分析仪进行检测分析.

（3）肝脏病理学观察.

大鼠肝脏和胆囊组织，用预冷的生理盐水冲

洗，分别取相同部位的肝组织面积约1 cm

2

浸泡在

4%多聚甲醛固定液中固定，用于石蜡包埋及苏木

精和曙红（H&E）染色后观察病理变化.肝组织在

4%多聚甲醛固定液中固定过夜，包埋在石蜡中，切

全自动生化分析仪（迈瑞科技），高速冷冻离心

机（美国SCILOGEX），高速低温组织研磨仪（中国

Servicebio公司），精密电子天平（德国Sartorius），超

Time PCR SystemPCR仪（美国Thermo）.

1.2　实验方法

1.2.1　黄秦艽高效液相色谱分析

微量分光光度计（美国Thermo），TC1000-G型PCR

基因扩增仪（美国SCILOGEX），ABI 7500 Fast Real-

成5 μm切片，依次将切片脱蜡至水后入苏木素染液

染色，切片依次入85%、95%的梯度酒精脱水各5 min

后入伊红染液中染色5 min，最后脱水封片成中性树

胶封片，显微镜镜检.对所有切片进行数字全视野

扫描成像后进行分析.

（4）qRT-PCR检测mRNA水平.

每只小鼠另取3份约100 mg的肝组织，按照说

明书从肝脏组织中提取总RNA.逆转录酶合成

（qRT-PCR）检测靶基因mRNA水平.使用特定的引

cDNA，荧光定量PCR仪进行实时荧光定量PCR

物对从cDNA制备物中扩增Fxr，胆盐输出泵（bile

salt export pump，Bsep），Shp，钠离子/牛磺胆酸共转

associated protein 2，Mpr2）和甘油醛-3-磷酸脱氢酶

达的相对量.

表1　qRT-PCR引物序列

Gene

Tab. 1　real-time quantitative PCR primer sequences

Forward 5′-CAAGGATACTGAGAGCAAGAGA - 3'

Forward 5′-GACCACGAAGACCAGATTGC-3′

Forward 5′-CAACGCATTGCTATTGCTCG-3′

Reverse 5′-GAGATGCCGCTCTTTCGAAT-3′

Reverse 5′-AGGCCCCTCCTGTTGTTAT - 3'

Primer sequence

课题组前期使用天然产物分离技术和现代波

谱技术从黄秦艽中分离得到35个化合物，通过现代

波谱学已鉴定出26个化合物，包括18个酮类化合

物，6个环烯醚萜类化合物，2个脂类化合物，并使用

［2］

HPLC建立了指纹图谱.利用分离得到的化合物根

据峰面积归一法计算得黄秦艽中相对含量多的几

个组分别为：龙胆苦苷（4.96％）、Tripteroside（peak7，

5.27％）、1，3-二羟基-4，7-二甲氧基酮（5.43％）、1-

5-四甲氧基酮（8.13％）、1-羟基-2，3，7-三甲氧基

（13.27％）

.

［8］

羟基-2，3，5-三甲氧基酮 （20.53％）、1-羟基-2，3，4，

酮（10.59％）、1-羟基-2，3，4，7-四甲氧基

1.2.2　动物分组、造模和给药

酮

运蛋白（Na+/taurocholate cotransporting Polypeptide，

Ntcp），多药耐药相关蛋白2（multidrug resistance-

（GAPDH）的转录本（表1）.通过2

-ΔΔCT

法计算基因表

小鼠按照体重随机分为5组，即正常组（NC）、模

型组（MC）、阳性对照熊去氧胆酸组（UDCA 45 mg/kg）、

WVBF低剂量组（WVBF 25 mg/kg）和WVBF高剂量

组（WVBF 50 mg/kg），每组10只. WVBF（25 mg/kg）和

MC组给予等量0.9%生理盐水. MC组和WVBF给

药组在第七天ig 75 mg/kg ANIT油溶液造模，NC组

灌胃等量橄榄油.

1.2.3　检测指标与方法

（1）临床状态观察.

观察小鼠的一般状态，包括活动度、反应性、精

神状态，以及腹腔肝脏和胆囊情况，对比各组小鼠

血清颜色情况.称取肝的重量，并运用公式：肝质量/

体质量（g/g）×100%，计算每只小鼠的肝系数.

（2）血液生化分析.

实验结束后，小鼠摘眼球取血于1.5 mL的EP管

中，室温静置2 h，在3000 r/min，4 ℃离心15 min，小

心吸取上层血清，分装，并保存于-80 ℃冰箱中，用

于血生化指标的检测.小鼠血清肝功能指标ALT和

AST的水平，胆囊功能指标TBA、T-Bil-V和D-Bil-V

WVBF（50 mg/kg）组ig WVBF，qd，连续给药10 d. NC组、

GAPDH

Fxr

Bsep

Shp

Ntcp

Mpr2

Reverse 5′-GTTCTGGATGGTGGACAAACG-3′

Forward5′-CGCATACCTGAAAGGCACTA-3′

Forward 5′-GCATGATGCCACTCCTCTTATAC-3′

Forward 5' - CAGTCACGGCTTCCTTTCTG - 3'

Reverse 5′-AGGTTTCCGCTGGGACTTCT - 3'

Reverse 5′-AGGGCGGAAGAAGAGATCTA-3′

Reverse 5′-TACATAGTGTGGCCTTTTGGACT-3′

（5）统计学分析.

数据以mean±SEM表示.使用SPSS 26.0软件对

组间所有数据进行统计分析，采用单因素方差分析

（ANOVA）和最小显著性差异（LSD）检验比较正态

分布数据的事后检验（post hoc test）分析不同组之间

的统计学差异.当P<0.05时为具有统计学意义.

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第 3 期

2　结果

2.1　WVBF对CHI小鼠一般状态的影响

给药期间小鼠精神状态良好，活动无明显异

张志豪，等：黄秦艽对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤保护研究

309

明显肿大且颜色呈墨绿色或黑色；经WVBF治疗

后，小鼠肝脏观察到少量白色坏死病灶，且在肝脏

周围未见明显出血点，胆囊颜色及大小均趋于正常.

如图2（b）所示，观察各组小鼠血清颜色差别，NC组

小鼠血清透明澄清，MC组小鼠血清为金黄色；经

近于NC组.小鼠肝脏系数如图2（c）所示，与NC组

WVBF治疗后，小鼠血清呈棕红色，颜色变淡逐渐趋

相比，MC小鼠肝脏系数显著升高（P<0.05）；与MC

组相比，WVBF治疗显著抑制了CHI小鼠肝脏系数

的升高（P<0.05）.

常，无被毛掉落现象. NC组小鼠被毛正常，MC组小

鼠造模后被毛蓬松.如图2（a）所示，NC组小鼠肝脏

柔润，无点状白色坏死点和出血点，胆囊颜色呈透

明淡黄色且大小正常；MC组小鼠肝脏颜色明显加

深，可见大量点状白色坏死灶及密集出血点，胆囊

（a）CHI鼠肝胆临床观察；矩形边框为局部病理放大图，黑色箭头表示胆囊，红色箭头表示出血点，绿色箭头表示白色坏死病灶；

##

（b）CHI小鼠血清颜色观察；（c）CHI小鼠肝脏系数；与NC组比较，**P<0.01；与MC组相比，

P<0.01，n=10.

图2 WVBF对CHI小鼠一般状态影响

2.2　WVBF对CHI小鼠肝胆功能的改善

Fig. 2　Effects of WVBF on general state of CHI mice

性细胞浸润.与NC组小鼠相比，MC组小鼠肝组织

多灶性凝固型坏死和变性改变，在肝窦处明显见

到炎性细胞大量聚集；与MC组小鼠相比，WVBF各

给药组小鼠肝细胞形态有所恢复，肝坏死和变性

细胞明显减少，少量的炎性细胞浸润，肝损伤得到

改善.

2.4　WVBF调节CHI小鼠FXR/SHP途径相关基因

的水平

为探讨WVBF在缓解ANIT诱导小鼠的肝损伤

以及胆汁酸代谢失调的作用机制，还检测了FXR/

BSEP传导途径中所涉及的一部分基因的mRNA水

平.结果如图5所示，与NC组相比，MC组小鼠肝脏

中Fxr、Shp、Bsep和Mpr2的mRNA水平显著降低（P<

0.05），Ntcp的mRNA水平显著升高（P<0.05）；与MC

组相比，WVBF各给药组治疗后，显著性上调了Fxr、

小鼠肝功能水平如图3（a）（b）所示，与NC组相

比，MC组的小鼠血清中ALT、AST水平显著升高（P<

0.05）；与MC组相比，WVBF各给药组治疗可显著

降低ALT、AST水平（P<0.05）.这些结果表明，WVBF

治疗抑制了ALT、AST水平的升高.小鼠胆囊功能水

平如图3（c）~（e）所示，与NC组相比，MC组的小鼠

血清中TBA、T-Bil-V和D-Bil-V水平显著升高（P<

0.05）；与MC组相比，WVBF各组治疗可显著降低

TBA、T-Bil-V和D-Bil-V水平（P<0.05）.结果表明

WVBF可抑制TBA、T-Bil-V和D-Bil-V水平上升.这

显示WVBF可改善ANIT诱导的小鼠CHI肝胆功能.

2.3　WVBF可改善CHI小鼠肝脏的病理损伤

肝脏HE染色如图4（a）（b）所示，NC组小鼠肝

细胞形态正常，未见肝细胞坏死，在肝窦处无炎

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310

中南民族大学学报（自然科学版）

第 42 卷

##

（a）ALT的水平；（b）AST的水平；（c）TBA的水平；（d）T-Bil-V的水平；（e）D-Bil-V的水平；与NC组比较，**P<0.01；与MC组相比，

P<0.01，n=10.

图3 WVBF对CHI小鼠肝胆功能指标的影响

Fig. 3　Effects of WVBF on hepatobiliary function indexes in CHI mice

（a）CHI小鼠肝组织HE染色（100×）；（b）CHI小鼠肝组织HE染色（200 ×）；红色箭头表示肝细胞坏死和变性，黑色箭头表示炎性细胞浸润.

图4 WVBF对CHI小鼠肝组织形态的影响

Fig.4　Effect of WVBF on liver tissue morphology in CHI mice

##

（a~e）CHI小鼠肝脏中Fxr

、

Shp

、

Bsep

、

Mpr2和Ntcp的 mRNA的水平；与NC组比较，**P<0.01；与MC组相比，

P<0.01，n=3

图5 WVBF对CHI小鼠FXR/SHP途径相关基因表达的影响

Shp、Mpr2和Bsep mRNA的水平（P<0.05），WVBF各

Fig.5　Effect of WVBF on the expression of FXR/SHP pathway-related genes in CHI mice

来缓解ANIT诱导小鼠的肝损伤以及胆汁酸代谢

失调.给药组Ntcp的mRNA水平显著降低（P<0.05）.这表

明WVBF可能通过调节FXR通路相关基因的表达

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第 3 期

3　讨论

病的有用模型，ANIT在肝脏中经过细胞色素P450

酶代谢，因胆管中的ANIT与谷胱甘肽（GSH）结合不

稳定，游离的高浓度ANIT会产生炎症并造成胆管

阻塞，胆管中胆汁返流入肝形成胆栓，进而造成肝

细胞损伤. 龙胆环烯醚萜苷类化合物是龙胆科药用

植物的特征成分，如黄秦艽的主要为龙胆苦苷、獐

芽菜苷和獐芽菜苦苷.WVBF及其活性成分龙胆苦

苷可以通过拮抗乌头碱诱导的细胞内ROS生成和

细胞内钙升高保护乌头碱诱导的H9c2心肌细胞的

体外心脏毒性

［9］

；WVBF中龙胆苦苷和獐芽菜苷可通

过诱导Akt的磷酸化并抑制肝癌细胞中Pck1 mRNA

水平而模拟胰岛素作用

［4］

.前期研究已经探讨了黄

秦艽及其特征成分抗心脏毒性以及肝保护作用，为

探讨WVBF对CHI的影响及其作用机制，本实验采

用ANIT制备CHI小鼠模型，研究其对胆汁淤积所致

的肝损伤的影响.

UDCA作为一种治疗胆汁淤积性肝病的安全性

ANIT诱导的CHI被认为是研究胆汁淤积性肝

张志豪，等：黄秦艽对ANIT诱导的小鼠胆汁淤积性肝损伤保护研究

311

明WVBF部分恢复ANIT诱导的小鼠的胆汁淤积，改

善肝损伤的作用.

胆汁酸代谢酶和转运蛋白的表达受FXR等核

受体的调节，在维持胆汁酸平衡上起着重要作

用

［14］

. FXR又称为胆汁酸受体，是一种配体依赖性

CHI小鼠模型FXR表达降低，WVBF处理后，可显著

上调Fxr mRNA的表达水平.已有研究证实，FXR通

胆汁酸的合成和摄取

［15］

.实验结果表明，WVBF作用

转录因子，在胆汁酸调节中起重要作用.本研究中，

过激活SHP来刺激胆汁酸解毒途径，从而抑制肝脏

于Fxr mRNA使Shp mRNA显著上调，抑制了胆汁酸

在肝脏内的合成.另外，已证明两个重要的转运蛋

白MRP2和BSEP是FXR的靶基因，并在转录水平上

而且，FXR激动剂GW4064也可以上调CHI模型中

Bsep mRNA的表达

［19］

，本文中观察到WVBF显著上

调Bsep mRNA的表达水平，与已有研究结果一致.

WVBF上调Mpr2 mRNA的表达水平，从而增加胆汁

要载体NTCP的作用下重吸收进入肝细胞，FXR抑

制NTCP的基因转录，下调NTCP的基因表达，胆汁

酸在肝脏的重吸收受到抑制，避免高浓度的胆汁酸

mRNA的表达水平，减少了胆汁酸重摄取进肝脏.

对肝脏的毒性

［20］

.结果表明，WVBF可显著下调Ntcp

少数民族地区对龙胆科植物的保肝作用积累

酸的转运外流，缓解CHI.肠道重吸收的胆汁酸在主

17］

直接由FXR诱导

［16，

，并负向调节NTCP的表达

［18］

.

好、服用方便的有效药物已在临床上广泛使用

［10］

，

具有促进受损肝细胞胆汁分泌功能，抑制肝细胞凋

亡和阻断胆汁酸导致的肝细胞和胆管损害等作

用

［11］

. UDCA可通过多种机制治疗肝内胆汁淤积，包

括作为细胞信号分子、刺激胆管HCO

3

-

分泌、激活

EGFR、MAPK信号通路和抑制肝脏异常的人类白细

胞抗原表达

［12］

.因此，本研究设置UDCA为阳性对照

组来探讨WVBF对CHI的影响及其作用机制.实验

不同组的小鼠灌胃两种剂量的WVBF 25 mg/kg和

了较为丰富的人用经验.如在藏族医学中蒂达即是

保肝、清“赤巴”病的经典药材.其基原植物川西獐

芽菜、印度獐芽菜等均为龙胆科植物，与黄秦艽均

含有龙胆苦苷、獐芽菜苷、獐芽菜苦苷等活性成分.

“赤巴位于身体肝胆处，是胃火也，诸饮食消化之基

本元素”的论述是胆腑理论的核心内容；胆腑理论

对于赤巴病的病源论述的根源是胆腑《.四部医典》

论述部第十章“染病之情”谓：赤巴位于血液和汗液

中，一旦发病，扩散极快.胆和赤巴二者是一个无形

的胆气和有形胆腑之间相互依存的关系，是一个脏

腑和它功能之间的理论表述形式.本研究证实了黄

秦艽的保肝利胆活性，与藏药蒂达的临床适应症一

致，为其进一步开发利用提供了理论依据.

因此，WVBF通过调节胆汁酸的合成、分泌、转

运和重吸收，显著降低CHI相关生化指标，改善

ANIT诱导的肝脏炎性细胞浸润，调节以FXR为核

胆汁酸平衡，对ANIT诱导的CHI有抗炎保肝作用.

心的胆汁酸代谢通路，降低肝内胆汁酸水平，维持

室前期已经通过建立2型糖尿病db/db小鼠模型给

50 mg/kg来评价WVBF对糖尿病肝损伤的保护作

和50 mg/kg并不总是呈剂量依赖关系，具有一定的

两个低剂量的WVBF对ANIT诱导的CHI小鼠的保

护作用.

解剖观察模型小鼠，肝脏表面有大量点状白色

坏死病灶及密集出血点，且能观察到胆囊明显肿大

并呈墨绿色；肝脏HE染色可见模型小鼠多处肝细

胞坏死及变性，且在肝窦处有炎性细胞浸润；ALT、

AST血生化指标提示肝损伤严重；胆功能指标TBA、

T-Bil-V和D-Bil-V明显增加；以上均提示ANIT造模

成功.在WVBF治疗后，上述病理改变得到缓解.表

用.此外，另一项研究表明，高剂量的WVBF 100 mg/kg

抑制作用

［13］

.因此，本研究采用25 mg/kg和50 mg/kg

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312

参考文献

中南民族大学学报（自然科学版）

第 42 卷

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（责编&校对 姚春娜）

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