可用于PET和切伦科夫发光成像的

6

是Y

12

,并且其余的W

11

和W

12

(即,当不是W

16

时)各自独立地为H,并且其余的Y

6

(即,当不是Y

12

时)是OH或NH

2

。

类似地,用于生产本技术的

18

F标记的蛙皮素受体激动剂的中间体包括但不限于这样的中间体,其包括蛙皮素受

体激动剂,蛙皮素受体激动剂的伯胺、仲胺、胍基的NH

2

、或脒基的NH

2

共价键合至W

16

或蛙皮素受体激动剂的羧酸或酰胺被修饰为-C(O)Y

12

。示例性的中间体包括分别对应于式VI的化合物和式VIA的化合物的式X的中间

体和式XA的中间体,不同之处在于所列举的W

13

、W

14

、Y

7

、Y

8

、Y

9

和Y

10

基团,其中在式X和XA中,W

13

和W

14

中的一个为W

16

或Y

7

、Y

8

、Y

9

和Y

10

中的一个为Y

12

,并且其余的W

13

和W

14

(即,当不是W

16

时)各自独立地为H,并且其余的Y

7

、Y

8

、Y

9

和Y

10

(即,当不是Y

12

时)各自独立地为OH或NH

2

。

本技术还提供了

18

F标记的seprase结合化合物的中间体,其中这样的中间体包括seprase结合化合

物,seprase结合化合物的伯胺、仲胺、胍基的NH

2

、或脒基的NH

2

共价键合至W

16

,或seprase结合化合物的羧酸或酰胺被修饰为-C(O)Y

11

基团。

对于上述示例性中间体,W

16

在每次出现时独立地为

并且Y

12

在每次出现时独立地为

其中T

9

为-C(O)-或-C(O)NH-,R

46

、R

47

和R

48

中的一个和R

49

、R

50

和R

51

中的一个为

R

46

、R

47

和R

48

中的其余两个各自为H并且R

49

、R

50

和R

51

中的其余两个各自为H;X

9

不存在,或者为O、S或NH;α和δ各自独立地为0、1、2或3;ε为0、1、2或3,条

件是当ε为0时X

9

不存在;并且β为0、1、2或3。

在相关方面,提供了形成

18

F标记的肽配体的任何方面和实施方案的化合物的方法。该方法包括在溶剂的存在

下使本文所述的中间体的任何方面和实施方案、铜盐和式XX的叠氮化物接触

其中χ在每次出现时独立地为1或2。铜盐可以是铜(I)盐(例如碘化铜(I))、铜(II)盐

(例如硫酸铜(II))、或其混合物。溶剂可以是质子溶剂、非质子溶剂、或其混合物。

本文使用的质子溶剂包括但不限于醇(例如甲醇(CH

3

OH)、乙醇(EtOH)、异丙醇(iPrOH)、三氟乙醇(TFE)、丁醇(BuOH)、乙二醇、丙二

醇)、羧酸(例如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、月桂酸、硬脂酸、脱氧胆酸、谷

氨酸、葡萄糖醛酸)、氨(NH

3

)、伯氨基化合物(例如甲胺、乙胺、丙胺)、仲氨基化合物(例如二甲胺、二乙胺、

二(正丙基)胺)、水、或其任何两种或更多种的混合物。如本文所用的极性非质子溶

剂包括但不限于醚(例如四氢呋喃(THF)、2-甲基四氢呋喃(2Me-THF)、二甲氧基乙

烷(DME)、二恶烷)、酯(例如乙酸乙酯、乙酸异丙酯)、酮类(例如丙酮、甲乙酮、

甲基异丁基酮)、碳酸酯(例如碳酸亚乙酯、碳酸亚丙酯、碳酸三亚甲基酯)、酰胺

(例如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMA))、腈类(例如乙腈(CH

3

CN))、丙腈(CH

3

CH

2

CN)、苄腈(PhCN))、亚砜(例如二甲基亚砜,也称为“DMSO”)、砜(例如环丁砜)、或

其任何两种或更多种的混合物。例如,溶剂可以包括DMF和DMSO。

在本技术的一个方面,提供了一种组合物,其包括本技术的

18

F标记的肽配体的各方面和实施方案中的任一个以及药学上可接受的载体。如本文

所用,“药学上可接受的载体”包括载体和/或赋形剂。在相关方面,提供了药物组合物,

该药物组合物包括有效量的用于对病症进行成像的本发明技术的

18

F标记的肽配体的方面和实施方案中任一项的化合物;并且其中所述病症包含表达

(例如,过表达)生长抑素受体(例如SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4和SSTR5中的

一种或多种)、蛙皮素受体(例如BBR1、BBR2和BBR3中的一种或多种)、seprase、

或其任意两种或更多种的组合的哺乳动物组织。包括生长抑素受体表达的示例性病

症包括但不限于产生生长激素的肿瘤、神经内分泌肿瘤、垂体瘤(例如分泌甲状腺

刺激激素)、神经内分泌肿瘤、类癌综合征、分泌血管活性肠肽的肿瘤、库欣氏病、

肢端肥大症、肝硬化肝病和艾滋病相关性腹泻。包括蛙皮素受体表达的示例性病症

包括但不限于肺小细胞癌、胃癌、胰腺癌和神经母细胞瘤。包括seprase表达的示

例性病症包括多种转移性癌症。在另一相关方面,提供了一种成像方法,其包括向对

象施用本技术的

18

F标记的肽配体的任何一个方面和实施方案的化合物(例如施用有效量)或者施用包

含有效量的本技术的

18

F标记的肽配体的任何一个方面和实施方案的化合物的药物组合物,并且在施用之

后,检测正电子发射、检测来自正电子发射和湮灭的γ射线(例如通过正电子发射断

层扫描)、和/或检测由于正电子发射引起的切伦科夫辐射(例如通过切伦科夫发光成

像)。在成像方法的任何实施方案中,对象可以被怀疑患有包含表达(例如,过表达)生

长抑素受体(例如SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4和SSTR5中的一种或多种)、

蛙皮素受体(例如BBR1、BBR2和BBR3中的一种或多种)、seprase、或其任意两

种或更多种的组合的哺乳动物组织的病症,其中示例性病症如上所述。检测步骤可

以在对对象的外科手术过程中发生,例如,以去除通过该方法成像的哺乳动物组织。

检测步骤可以包括使用手持设备来执行检测步骤。例如,可以通过使用超高灵敏度

光学相机(例如,电子倍增电荷耦合器(EMCCD)相机)检测切伦科夫光来获取切伦科

夫发光图像。

“有效量”是指产生所需效果所需的化合物或组合物的量,例如需要通过所选检测方

法检测的本技术必需的化合物的量。例如,本技术的化合物的有效量包括能够检测

化合物与目标靶标的结合的有效量,该靶标包括但不限于产生生长激素的肿瘤、神

经内分泌肿瘤、垂体瘤、分泌血管活性肠肽的肿瘤、肺小细胞癌、胃癌组织、胰腺

癌组织、神经母细胞瘤和转移性癌症中的一种或多种。有效量的另一个实施例包括

能够在具有表达(例如,过表达)生长抑素受体(例如SSTR1、SSTR2、SSTR3、

SSTR4和SSTR5中的一种或多种)、蛙皮素受体(例如BBR1、BBR2和BBR3中的

一种或多种)、seprase、或其任意两种或更多种的组合的组织的对象中提供来自正

电子发射和湮灭的可检测的γ射线发射(高于背景)的量或剂量,例如,统计学上显著

高于背景的发射。有效量的另一个实施例包括在具有表达(例如,过表达)生长抑素受

体、蛙皮素受体、seprase、或其任意两种或更多种的组合的组织的对象中能够提供

由于正电子发射引起的可检测的切伦科夫辐射发射(高于背景)的量或剂量,例如,统

计学上显著高于背景的发射。如本文所用,“对象”或“患者”是哺乳动物,例如猫、狗、

啮齿动物或灵长类动物。通常,对象是人,并且优选地,患有或疑似患有包含表达(例

如,过表达)生长抑素受体、蛙皮素受体、seprase、或其任意两种或更多种的组合的

哺乳动物组织的病症的人,所述病症例如是产生生长激素的肿瘤、神经内分泌肿瘤、

垂体瘤、分泌血管活性肠肽的肿瘤、肺小细胞癌、胃癌组织、胰腺癌组织、神经母

细胞瘤和转移性癌症中的一种或多种。术语“对象”和“患者”可互换使用。

本技术提供的药物组合物和药物包含本文公开的任何实施方案的任何一种或多种

18

F标记的肽配体(例如

18

F标记的生长抑素受体激动剂、

18

F标记的蛙皮素受体激动剂、

18

F标记的seprase结合化合物、式I、IA、IB、II、IIA、III、IIIA、IV、IVA、V、

VA、VI和VIA中的任何一个或多个的任何实施方案的化合物)和药学上可接受的

载体或一种或多种赋形剂或填充剂(这些载体、赋形剂、填充剂等将被统称为“药学

上可接受的载体”,除非使用更具体的术语)。该组合物可以用于本文所述的方法和

成像中。此类组合物和药物包括有效量的用于对本文所述的一种或多种病症成像的

本文公开的任何

18

F标记的肽配体(例如

18

F标记的生长抑素受体激动剂、

18

F标记的蛙皮素受体激动剂、

18

F标记的seprase结合化合物、式I、IA、IB、II、IIA、III、IIIA、IV、IVA、V、

VA、VI和VIA中的任何一个或多个的任何实施方案的化合物)。药物组合物可以

以单位剂型包装。例如,当施用于对象时,单位剂型可以有效地对表达(例如,过表达)

生长抑素受体、蛙皮素受体、seprase、或其任意两种或更多种的组合的哺乳动物组

织进行成像。此类哺乳动物组织可以包括产生生长激素的肿瘤、神经内分泌肿瘤、

垂体瘤、分泌血管活性肠肽的肿瘤、肺小细胞癌、胃癌组织、胰腺癌组织、神经母

细胞瘤和转移性癌症中的一种或多种。

可以通过将一种或多种本技术的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体、其

互变异构体或其溶剂化物与药学上可接受的载体、赋形剂、粘合剂、稀释剂等混合,

来制备药物组合物和药物,当施用于对象时,对与表达(例如,过表达)生长抑素受体、

蛙皮素受体、seprase、或其任意两种或更多种的组合的哺乳动物组织相关的病症成

像。此类哺乳动物组织可以包括产生生长激素的肿瘤、神经内分泌肿瘤、垂体瘤、

分泌血管活性肠肽的肿瘤、肺小细胞癌、胃癌组织、胰腺癌组织、神经母细胞瘤和

转移性癌症中的一种或多种。本文所述的化合物和组合物可以用于制备用于对与此

类哺乳动物组织相关的多种病症成像的制剂和药物。此类组合物能够是以下形式,

例如颗粒、粉末、片剂、胶囊、糖浆、栓剂、注射剂、乳剂、酏剂、悬浮液或溶液。

本组合物能够被配制用于各种施用途径,例如,通过肠胃外或全身施用。肠胃外或全

身施用包括但不限于皮下、静脉内、腹膜内和肌肉内注射。以下剂型是作为实施例

给出的,不应该解释为限制本发明的技术。

用于口服施用的液体剂型可以是药学上可接受的乳液、悬浮液和溶液的形式,其可

以含有惰性稀释剂,例如水。药物制剂和药物可以使用无菌液体制备成液体悬浮液

或溶液,所述无菌液体例如但不限于油、水、醇和这些的组合。可以加入药学上合

适的表面活性剂、悬浮剂、乳化剂用于口服或肠胃外施用。

如上所述,悬浮液可以包括油。这些油包括但不限于花生油、芝麻油、棉籽油、玉

米油和橄榄油。悬浮液制备还可以含有脂肪酸酯,例如油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、

脂肪酸甘油酯和乙酰化脂肪酸甘油酯。悬浮液配方可以包括醇,例如但不限于乙醇、

异丙醇、十六烷醇、甘油和丙二醇。醚类,例如但不限于聚(乙二醇)、石油烃类如矿

物油和凡士林;以及水也可以用于悬浮液配方中。

可注射剂型通常包括水相悬浮液或油悬浮液,其可以使用合适的分散剂或润湿剂和

悬浮剂制备。可注射形式可以是溶液相或悬浮液形式,其用溶剂或稀释剂制备。可

接受的溶剂或载体包括无菌水、林格氏(Ringer′s)溶液或等渗盐水溶液。等渗溶液将

被理解为与对象等渗。或者,无菌油可以用作溶剂或悬浮剂。通常,油或脂肪酸是非

挥发性的,包括天然或合成油、脂肪酸、甘油单酯、甘油二酯或甘油三酯。

对于注射,药物制剂和/或药物可以是适合用如上所述的适当溶液重构的粉末。这些

的实施例包括但不限于冷冻干燥、旋转干燥或喷雾干燥的粉末、无定形粉末、颗粒、

沉淀物或颗粒。对于注射,制剂可以任选地含有稳定剂、pH调节剂、表面活性剂、

生物利用度调节剂和这些的组合。

除了上述那些代表性的剂型之外,药学上可接受的赋形剂和载体通常是本领域技术

人员已知的,因此包括在本技术中。此类赋形剂和载体描述于例如

“RemingtonsPharmaceuticalSciences”.,NewJersey(1991),通过引用并入本

文。

本组合物还可以包含例如胶束或脂质体,或一些其他包囊形式,或者可以以延长释放

形式施用以提供延长的储存和/或递送效果。

具体剂量可以根据对象的疾病的状况、年龄、体重、综合的健康状况、性别和饮食、

剂量间隔、施用途径、排泄率和药物的组合来调整。含有有效量的任何上述剂型都

在常规实验的范围内,因此,完全在本技术的范围内。

本领域技术人员能够通过简单地以增加的量向患者施用本技术的化合物,直到例如

当施用于对象时表达(例如,过表达)生长抑素受体、蛙皮素受体、seprase、或其任意

两种或更多种的组合的哺乳动物组织达到统计学上显著的分辨率(通过例如正电子

发射断层扫描或切伦科夫发光成像),以确定有效量。此类哺乳动物组织可以包括产

生生长激素的肿瘤、神经内分泌肿瘤、垂体瘤、分泌血管活性肠肽的肿瘤、肺小细

胞癌、胃癌组织、胰腺癌组织、神经母细胞瘤和转移性癌症中的一种或多种。本技

术的化合物可以以每天约0.1至约1,000mg的剂量水平施用于患者。对于体重约

70kg的正常成年人,每天每千克体重约0.01至约100mg的剂量就足够了。然而,所

使用的具体剂量能够变化,或者可以根据本领域普通技术人员认为合适的方式进行

调整。例如,剂量能够取决于许多因素,包括患者的要求、成像的病症的严重程度和

所用化合物的药理学活性。确定特定患者的最佳剂量是本领域技术人员公知的。能

够容易地采用各种测定和模型系统来确定根据本技术的化合物的有效性。

本技术的化合物还能够与其他常规成像剂一起施用于患者,当施用于对象时,所述常

规成像剂可用于表达(例如,过表达)生长抑素受体、蛙皮素受体、seprase、或其任意

两种或更多种的组合的哺乳动物组织的成像。此类哺乳动物组织可以包括产生生长

激素的肿瘤、神经内分泌肿瘤、垂体瘤、分泌血管活性肠肽的肿瘤、肺小细胞癌、

胃癌组织、胰腺癌组织、神经母细胞瘤和转移性癌症中的一种或多种。因此,本技

术的药物组合物可以进一步包括不同于本技术的

18

F标记的肽配体的成像剂。施用可以包括肠胃外施用。在任何这些实施方案中,施

用可以包括皮下注射、静脉内注射、腹膜内注射或肌内注射。本技术的方法还可以

包括与一种或多种本技术的化合物依序地或组合地施用常规成像剂,当施用于对象

时,常规成像剂的量可以潜在地或协同地有效地用于表达(例如,过表达)生长抑素受

体、蛙皮素受体、seprase、或其任意两种或更多种的组合的哺乳动物组织的成像。

在一个方面,本发明技术的化合物以适于成像的量或剂量施用于患者。通常,包含本

技术的化合物的单位剂量将根据患者的考虑而变化。这些考虑因素包括例如年龄、

方案、病症、性别、疾病程度、禁忌症、伴随治疗等。基于这些考虑因素的示例性

单位剂量也能够被本领域技术人员调整或修改。例如,患者的包含本技术的化合物

的单位剂量可以从1×10

-

4

g/kg至1g/kg变化,优选为1×10

-3

g/kg至1.0g/kg。本技术化合物的剂量也可以从0.01mg/kg至100mg/kg变化,或优选

为0.1mg/kg至10mg/kg。

本技术的化合物还能够被修改,例如通过有机部分的共价连接或缀合物(conjugate)来

改善药代动力学性质、毒性或生物利用度(例如,体内半衰期延长)。缀合物能够是直

链或支链亲水聚合物基团、脂肪酸基团或脂肪酸酯基团。聚合物基团能够包含能够

由本领域普通技术人员调节的分子量,以改善例如药代动力学性质、毒性或生物利

用度。示例性缀合物能够包括聚链烷二醇(polyalkaneglycol)(例如聚乙二醇(PEG)、

聚丙二醇(PPG))、碳水化合物聚合物、氨基酸聚合物或聚乙烯吡咯烷酮和脂肪酸或

脂肪酸酯基团,其各自能够独立地包含约八至约七十个碳原子。与本技术的化合物

一起使用的缀合物还能够用作连接至例如任何合适的取代基或基团、放射性失踪标

记(标记或标签)、卤素、蛋白质、酶、多肽、其他治疗剂(例如,药品或药物)、核苷、

染料、寡核苷酸、脂质、磷脂和/或脂质体的连接基团。在一个方面,缀合物能够包

括聚乙烯亚胺(polyethyleneamine,PEI)、聚甘氨酸、PEI和聚甘氨酸的杂化物、聚乙

二醇(PEG)或甲氧基聚乙二醇(mPEG)。缀合物还能够将本技术的化合物与例如标签

(荧光的或发光的)或标记(放射性核素、放射性同位素和/或同位素)连接以包含本技

术的探针。在一个方面,与本技术的化合物一起使用的缀合物能够改善体内半衰期。

与本技术的化合物一起使用的其他示例性缀合物及其应用和相关技术包括普遍地通

过美国专利号5,672,662描述的那些,该专利通过引用并入本文。

术语“相联的”和/或“结合”能够指例如本技术的化合物与目标靶标之间的化学或物

理相互作用。相联的或相互作用的实施例包括共价键、离子键、亲水-亲水相互作

用、疏水-疏水相互作用和配合物。相关的通常还能够指“结合”或“亲和力”,因为各

自都能够用于描述各种化学或物理相互作用。测量结合或亲和力对于本领域技术人

员来说也是常规的。例如,本技术的化合物能够与目标靶标或其前体、部分、片段

和肽和/或它们的沉积物结合或相互作用。

本文提供的实施例是为了说明本技术的优点并进一步帮助本领域普通技术人员制备

或使用本技术的化合物或盐、药物组合物、衍生物、溶剂化物、代谢物、前药、外

消旋混合物、或其互变异构形式。提供的本文的实施例为了更全面地说明本技术的

优选方面。这些实施例决不应该被解释为限制由所附权利要求限定的本技术的范围。

实施例能够包括或包含上述本技术的任何变化、方向或方面。上述的变化、方向或

方面还可以各自进一步包括或包含本技术的任何或所有其他变化、方向或方面的变

化。

本技术的

18

F标记的肽配体的合成

可以通过本领域已知的任何方法合成本技术的

18

F标记的肽配体的肽。化学合成肽的示例性非限制性方法包括在

“SolidPhasePeptideSynthesis,”SecondEdition,PierceChemicalCompany(1984)中由

Stuart和Young以及在

“SolidPhasePeptideSynthesis,”MethodsEnzymol.289,AcademicPress,Inc,NewYork(1997)

中描述的方法。此外,可以使用分子生物学、蛋白质生物化学、细胞生物学和微生

物学中的常规技术产生重组肽,例如分别在以下中描述

的:CurrentProtocolsinMolecularBiology,Vols.I-

III,Ausubel,Ed.(1997);Sambrooketal.,MolecularCloning:ALaboratoryManual,SecondEd.(

ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NY,1989);DNACloning:APractica

lApproach,,Glover,Ed.(1985);OligonucleotideSynthesis,Gait,Ed.(1984);Nucle

icAcidHybridization,Hames&Higgins,Eds.(1985);TranscriptionandTranslation,Hames&

Higgins,Eds.(1984);AnimalCellCulture,Freshney,Ed.(1986);ImmobilizedCellsandEnzym

es(IRLPress,1986);Perbal,APracticalGuidetoMolecularCloning;theseries,l.,

(AcademicPress,Inc.,1984);GeneTransferVectorsforMammalianCells,Miller&Calos,Eds.(

ColdSpringHarborLaboratory,NY,1987);以及

l.,Vols.154and155,Wu&Grossman,andWu,Eds.。

本领域普通技术人员还容易理解由肽合成本技术的

18

F标记的肽配体,包括鉴于本公开,其中本技术的

18

F标记的肽配体的合成的示例性方案包括与国际申请PCT/US2017/039710号中描述

的相似的方案,其通过引用并入本文,并且其中下面提供了对国际申请

PCT/US2017/039710号的实施例的更详细的讨论。

国际申请PCT/US2017/039710号中提供的合成和实施例

对于国际申请PCT/US2017/039710号的实施例,除非另有说明,否则所有溶剂均购自

SigmaAldrich并且具有试剂级质量。通过在活性化的不锈钢柱

(PureProcessTechnology,LLC)柱上蒸馏或通过在活性化的分子筛上干燥来干燥溶剂。

试剂购自SigmaAldrich、AlfaAesar、CombiBlocks、ChemBridge和Enamine,并且具

有试剂级质量,除3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯胺(烯胺)外,其是通过HPLC而80-85%纯的。

所有反应均在干燥的玻璃器皿中进行。在

HighPuritySilicaGel

上使用硅胶柱层析进行纯化。制备型HPLC是在配备有

AgilentProStar325DualWavelengthUV-Vis检测器的双泵AgilentProStarHPLC上,使用

XBridge

TM

PrepC185μmOBDTM19x100mm柱(Waters)进行。在220nm和280nm监测UV吸收。

使用二元溶剂系统:溶剂A包含H

2

O+0.01%TFA,溶剂B由90%v/vMeCN/H

2

O+0.01%TFA组成。使用以下梯度HPLC方法实现纯化:0%B0-1分钟、0-100%B1-

28分钟、100-0%B28-30分钟。

使用薄层色谱、分析型HPLC、质谱和NMR光谱鉴定和表征最终产物。分析型

HPLC是使用XSelect

TM

CSH

TM

C185μm4.6x50mm柱(Waters)进行。使用结合WatersSQDetector2的

WatersACQUITY

通过LCMS分析进行质量测定。使用BrukerAvanceIII500MHz光谱仪进行NMR分

析。光谱以ppm报告,并参考DMSO-d6或氯仿-d(SigmaAldrich)中的溶剂共振。通

过LC-MS和1HNMR判断,在生物测定中评估的所有化合物的纯度>95%纯度。

国际申请PCT/US2017/039710号的中间体的代表性合成

代表性的合成方法(途径A和B)在下面的方案2中提供,用于生成国际申请

PCT/US2017/039710号的示例性中间体。

方案2.

,CDI,NEt

3

;,NEt

3

,0°C;c.H

2

N-Lys(Cbz)-OtBu;d.H

2

,Pd/C;,CDI,NEt

3

;,NEt

3

,0°C;g.2-或4-(2-丙炔-1-基氧基)苯胺或3-乙炔基苯胺,rt;/CH

2

Cl

2

;/CH

2

Cl

2

;j.三光气,NEt

3

,回流;

3

,rt.

下面提供了示例性中间体通过途径A和途径B的合成。

二叔丁基(1H-咪唑-1-羰基)L-谷氨酸酯(17)。将L-H-Glu(OtBu)-OtBu(1.25g,4.23mmol)

的盐酸盐溶解在具有催化量的N,N′-二甲基氨基吡啶(50mg)的CH

2

Cl

2

(30mL)中,并将溶液冷却至0°C并在Ar下搅拌。加入三乙胺(4.5mL),然后加入1,1′-

羰基二咪唑(754mg,4.65mmol),并将所得混合物搅拌过夜,同时升温至室温。然后用

CH

2

Cl

2

稀释反应,并依次用H

2

O和饱和NaCl溶液洗涤。将有机层用MgSO

4

干燥、过滤并减压浓缩,得到油状物,静置后固化。通过硅胶柱层析(0-100%MeOH的

EtOAc溶液)纯化粗产物,得到产物二叔丁基(1H-咪唑-1-羰基)-L-谷氨酸酯(17),为透

明油状物(1.00g,产率61%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ8.18(s,1H),7.48(d,1H,J=6.2Hz),7.42(s,1H),7.10(s,1H),4.45(m,1H),2.44(m,2H),2.18(m,

2H),1.50(s,9H),1.46(s,9H)。

三叔丁基(9S,13S)-3,11-二氧-1-苯基-2-氧杂-4,10,12-三氮杂十五烷-9,13,15-三羧酸酯

(18)。将二叔丁基(1H-咪唑-1-羰基)-L-谷氨酸酯(17)(572mg,1.48mmol)的二氯乙烷

(6mL)溶液冷却至0°C并在Ar下搅拌。加入三甲胺(0.42mL,3.0mmol)的二氯乙烷

(1mL)溶液,然后加入三氟甲磺酸甲酯(160μL,1.5mmol)的二氯乙烷溶液。将反应搅拌

60分钟,升温至室温。然后加入L-H-Lys(Cbz)-(552mg,1.48mmol)的二氯乙

烷(10mL)溶液,并将反应混合物在50°C、Ar下搅拌6小时。然后将混合物冷却至室

温并减压浓缩,得到油状物。通过硅胶柱层析(20%EtOAC的己烷溶液至50%EtOAc

的己烷溶液)纯化该油状物,得到产物三叔丁基(9S,13S)-3,11-二氧-1-苯基-2-氧杂-

4,10,12-三氮杂十五烷-9,13,15-三羧酸酯(18),为透明油状物(678mg,产率74%)。

二叔丁基(((S)-6-氨基-1-(叔丁氧基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酰基)-L谷氨酸酯(1)。

碳棒(0.1eq)上将活性化的钯悬浮在三叔丁基(9S,13S)-3,11-二氧-1-苯基-2-氧杂-

4,10,12-三氮杂十五烷-9,13,15-三羧酸酯(18)(500mg)的EtOH(15mL)溶液中。将该悬

浮液在室温下、在H

2

氛围下搅拌过夜。然后将混合物通过寅氏盐(celite)过滤,并将滤液减压浓缩,得到产

物二叔丁基(((S)-6-氨基-1-(叔丁氧基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酰基)-L谷氨酸酯(1),

为粘性油(360mg,产率92%)。

途径A合成

二叔丁基(((S)-1-(叔丁氧基)-6-(1H-咪唑-1-甲酰胺基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酰基)-

L谷氨酸酯(2)。将化合物1(1.46g,3.0mmol)与三乙胺(0.84mL,6.0mmol)和催化量的

N,N′-二甲基氨基吡啶(15mg)一起溶解在二氯乙烷(10mL)中,并在室温下、在Ar下

搅拌。5分钟后,加入1,1′-羰基二咪唑(486mg,3.3mmol)的二氯乙烷(2mL)悬浮液,在

Ar下搅拌反应过夜。然后依次用1%v/vAcOH的H

2

O溶液和饱和NaCl溶液洗涤溶液。将有机层用MgSO

4

干燥、过滤并减压浓缩,得到黄色油状物。通过硅胶柱层析(50%EtOAc的己烷溶液

至10%MeOH的EtOAc溶液)纯化该油状物,得到产物二叔丁基(((S)-1-(叔丁氧基)-6-

(1H-咪唑-1-甲酰胺基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酰基)-L谷氨酸酯(2),为灰白色粉末

(产率60%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ8.34(s,1H),7.94(brs,1H),7.69(s,1H),7.05(s,1H),5.95(d,1H,J=7.8Hz),5.58(d,1H,J=7.6Hz

),4.21(m,1H),4.16(m,1H),3.53(m,1H),3.28(m,1H),2.30(m,2H),2.05(m,1H),1.83(m,1H),1.

79(m,1H),1.72(m,1H),1.50(m,2H),1.43(s,18H),1.38(s,9H),1.32(m,2H).ESI(+)=582.5(M+

H)

+

。计算的质量:581.34。

二叔丁基(((S)-1-(叔丁氧基)-1-氧代-6-(3-(2-丙-2炔-1-基氧基)苯基)脲基)己烷)-2-基)

氨基甲酰基-L-谷氨酸酯(3)。二叔丁基(((S)-1-(叔丁氧基)-6-(1H-咪唑-1-甲酰胺基)-1-

氧代己-2-基)氨基甲酰基)-L谷氨酸酯(2)(182mg,0.30mmol)的二氯乙烷(4mL)溶液冷

却至0°C并在Ar下搅拌。加入三乙胺(87μL,0.63mmol)的二氯乙烷(1mL)溶液,然后

加入三氟甲磺酸甲酯(34uL,0.31mmol)的二氯乙烷(1mL)溶液。将反应搅拌60分钟,

升温至室温。然后将2mL反应混合物在Ar下转移至2-(2-丙炔-1-基氧基)苯胺

(15mg,0.10mmol)的二氯乙烷(1mL)溶液的圆底烧瓶中。将所得混合物在室温下在

Ar下搅拌16小时。然后将混合物冷却至室温并减压浓缩,得到油状物。通过反相制

备型HPLC(12mL/min,0%B至100%B30分钟,然后以100%B5分钟,λ=220nm,254nm)

纯化油状物。将含有产物的峰值冷冻干燥,得到产物二叔丁基(((S)-1-(叔丁氧基)-1-

氧代-6-(3-(2-丙-2炔-1-基氧基)苯基)脲基)己烷)-2-基)氨基甲酰基-L-谷氨酸酯(3),为

白色粉末(28mg,产率45%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ8.20(d,1H,J=7.8Hz),7.45(brs,1H),6.97(m,1H),6.84(m,2H),6.71(m,2H),6.00(brs,1H),5.6

9(brs,1H),5.50(d,1H,J=7.0Hz),4.67(dd,2H,J

1

=7.2Hz,J

2

=2.4Hz),4.36(m,1H),4.21(m,1H),3.12(m,2H),2.54(t,1H,J=2.4Hz),2.33(m,2H),2.03(m,1H)

,1.87(m,1H),1.75(m,1H),1.54-1.38(m,5H),1.41(s,18H),1.37(s,9H).ESI(+)=661.5(M+H)

+

。计算的质量:660.37。

二叔丁基(((S)-1-(叔丁氧基)-6-(3-(2-乙炔基苯基)脲基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酰

基)-L-谷氨酸酯(4)。通过相同的方法由3-乙炔基苯胺(1.1eq)和脲(2)(1.0eq)合成该化

合物,并分离为橙色半固体(33%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ7.90(s,1H),7.58(t,1H,J=1.7Hz),7.51(dd,1H,J

1

=8.2Hz,J

2

=1.3Hz),7.18(t,1H,J=7.9Hz),7.05(d,1H,J=7.7Hz),6.38(d,1H,J=7.9Hz),6.28(brs,1H),5.77(

d,1H,J=6.9Hz),4.32(m,1H),4.02(m,1H),3.53(m,1H),3.05(m,1H),3.00(s,1H),2.39(m,2H),2

.07(m,1H),1.88(m,1H),1.74(m,1H),1.62(m,1H),1.49-

1.37(m,4H),1.41(s,18H),1.37(s,9H).ESI(+)=631.5(M+H)

+

。计算的质量:630.36。

二叔丁基(((S)-1-(叔丁氧基)-1-氧代-6-(3-(4-丙-2-炔-1-基氧基)苯基)脲基)已烷-2-基)

氨基甲酰基)-L-谷氨酸酯(5)。通过相同的方法由[4-(2-丙炔-1-基氧基)苯基]胺盐酸盐

(1.1eq)和脲(2)(1.0eq)合成该化合物,并分离为浅棕色油(46%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ7.60(s,1H),7.33(d,2H,J=9.0Hz),6.86(d,2H,J=9.0Hz),6.24(d,1H,J=7.8Hz),6.05(brs,1H),5

.71(d,1H,J=7.0Hz),4.61(d,2H,J=2.3Hz),4.30(m,1H),4.03(m,1H),3.45(m,1H),3.05(m,1H),

2.47(t,1H,J=2.3Hz),2.31(m,2H),2.06(m,1H),1.83(m,1H),1.75(m,1H),1.48(m,3H),1.41(s,9

H),1,39(s,9H),1.37(s,9H),1.31(m,2H).ESI(+)=661.4(M+H)

+

。计算的质量:660.37。

(((S)-1-羧基-5-(3-(2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)-L-谷氨酸(6)。

二叔丁基(((S)-1-(叔丁氧基)-1-氧代-6-(3-(2-丙-2炔-1-基氧基)苯基)脲基)己烷)-2-基)

氨基甲酰基-L-谷氨酸酯(3)(4.2mg,6.4μmol)溶解在CH

2

Cl

2

(0.5mL)中。加入三氟乙酸(0.5mL),并将混合物在室温下搅拌过夜。在N

2

气流下除去挥发性溶剂,将得到的粗渣冻干,得到产物(((S)-1-羧基-5-(3-(2-(丙-2-炔-1-

基氧基)苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)-L-谷氨酸(6),为白色粉末(3.1mg,产率98%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.10(m,1H),7.83(s,1H),7.03(m,1H),6.90(brs,1H),6.86(m,2H),6.33(d,1H,J=12.5Hz),6.

31(d,1H,J=12.5Hz),4.86(d,2H,J=2.3Hz),4.10(m,2H),3.60(t,1H,J=2.3Hz),3.06(m,2H),2.24

(m,2H),1.93(m,1H),1.69(m,2H),1.56(m,1H),1.42(m,2H),1.32(m,2H).ESI(+)=493.3(M+H)

+

。计算的质量:492.19。

(((S)-1-羧基-5-(3-(3-乙炔基苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)-L-谷氨酸(7)。通过相同的

方法将炔烃(4)脱保护,分离出标题化合物,为白色粉末(61%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.42(s,1H),7.11(m,2H),6.91(d,1H,J=8.2Hz),6.50(dd,1H,J

1

=8.2Hz,J

2

=2.4Hz),6.31(m,2H),6.13(brs,1H),4.71(d,2H,J=2.2Hz),4.08(m,2H),3.05(m,2H),2.24(m,2

H),1.91(m,1H),1.70(m,2H),1.54(m,1H),1.41(m,2H),1.30(m,2H).ESI(+)=463.3(M+H)

+

。计算的质量:462.18。

((1-羧基-5-(3-(4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)谷氨酸(8)。通过相

同的方法将炔烃(5)脱保护,分离出标题化合物,为白色粉末(96%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.28(s,1H),7.31(d,2H,J=9.0Hz),6.87(d,2H,J=9.0Hz),6.35(d,1H,J=11.4Hz),6.34(d,1H,

J=11.4Hz),6.09(brs,1H),4.72(d,2H,J=2.3Hz),4.10(m,2H),3.54(t,1H,J=2.3Hz),3.06(m,2H),

2.25(m,2H),1.93(m,1H),1.63(m,2H),1.53(m,1H),1.42(m,2H),1.31(m,2H).ESI(+)=493.3(

M+H)

+

。计算的质量:492.19。

途径B合成

(((S)-5-氨基-1-羧戊基)氨基甲酰基)-L-谷氨酸(9)。将化合物(1)(1.22g,2.5mmol)溶解

在CH

2

Cl

2

(5mL)中。加入三氟乙酸(1.5mL),并将反应在室温下搅拌过夜。在N

2

气流下除去挥发性物质,并将粗产物冻干,得到(((S)-5-氨基-1-羧戊基)氨基甲酰基)-L-

谷氨酸(9),为粘性油状物(700mg,88%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ7.71(s,2H),6.37(m,2H),4.08(m,2H),2.78(m,2H),2.25(m,2H),1.93(m,1H),1.70(m,2H),

1.53(m,3H),1.32(m,2H)。

(((S)-1-羧基-5-(3-(2-乙炔基苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)-L-谷氨酸(10)。在室温下,

在Ar下,将2-乙炔基苯胺(30μL,0.26mmol)的甲苯(1mL)溶液缓慢加入到三光气

(56mg,0.19mmol)的甲苯(3mL)溶液中。加入三乙胺(42μL,0.30mmol)并将反应加热至

回流6小时。减压除去溶剂,将粗渣(黄色/白色半固体)溶于DMF(2mL)中。然后加

入胺(9)(60mg,0.19mmol)的DMF(1mL)溶液,接着加入三乙胺(42μL,0.30mmol)。反应

在室温下搅拌90分钟。减压浓缩混合物,并将粗渣通过反相制备型HPLC纯化

(12mL/min,0%B至100%B30分钟,然后100%B5分钟;λ=220nm,254nm)。收集含有

产物的峰并冻干,得到(((S)-1-羧基-5-(3-(2-乙炔基苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)-L-谷

氨酸(10),为白色粉末(27mg,产率31%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.13(d,1H,J=8.5Hz),7.86(s,1H),7.37(dd,1H,J

1

=7.6Hz,J

2

=1.3Hz),7.27(m,1H),7.23(brs,1H),6.90(t,1H,J=7.6Hz),6.34(m,2H),4.56(s,1H),4.10(m,2H)

,3.08(m,2H),2.25(m,2H),1.93(m,1H),1.70(m,2H),1.57(m,1H),1.44(m,2H),1.33(m,2H).ES

I(+)=463.5(M+H)

+

;ESI(-)=461.2(M-H)

-

。计算的质量:462.18。

((1-羧基-5-(3-(3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)谷氨酸(11)。通过相

同的方法由胺(9)和3-(丙-2-炔-1-基氧基)苯胺合成该化合物,并分离为浅棕色粉末

(13%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.54(s,1H),7.61(s,1H),7.32(dd,1H,J

1

=8.1Hz,J

2

=1.3Hz),7.21(t,1H,J=7.8Hz),6.98(d,1H,J=7.6Hz),6.33(m,2H),6.21(brs,1H),4.11(s,2H),4.0

8(m,2H),3.06(m,2H),2.24(m,2H),1.93(m,1H),1.71(m,2H),1.55(m,1H),1.43(m,2H),1.31(

m,2H).ESI(+)=493.1(M+H)

+

。计算的质量:492.19。

(((S)-1-羧基-5-(3-(4-乙炔基苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)-L-谷氨酸(12)。通过相同的

方法由胺(9)和4-乙炔基苯胺合成该化合物,并分离为浅绿色粉末(38%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.64(s,1H),7.40(d,2H,J=8.5Hz),7.32(d,2H,J=8.5Hz),6.33(m,2H),6.22(brs,1H),4.10(m

,2H),3.99(s,1H),3.07(m,2H),2.25(m,2H),1.93(m,1H),1.70(m,2H),1.55(m,1H),1.43(m,2H)

,1.31(m,2H).ESI(+)=463.4(M+H)

+

;ESI(-)=461.3(M-H)

-

。计算的质量:462.18。

来自代表性的中间体的国际申请PCT/US2017/039710号的代表性

19

F化合物

以下方案3中提供了代表性的合成方法,其产生国际申请PCT/US2017/039710号的

说明

18

F化合物的示例性的

19

F化合物,下面是这些示例性

19

F化合物的合成的更详细的描述。

方案3.

2-氟乙基甲苯磺酸盐(13)。将四丁基氟化铵(2.2mL,1.0M在THF中)的溶液加入到二

(对甲苯磺酰基)乙二醇(740mg,2.0mmol)在THF(15mL)中的悬浮液中,并将混合物在

Ar下加热至回流,过夜。然后将反应冷却至室温并减压除去溶剂。将粗渣划分为H

2

O和EtOAc。分离各层,并且水层用EtOAc萃取。合并有机层,用MgSO

4

干燥,过滤并减压浓缩,得到无色油状物。通过硅胶柱层析(20%EtOAc的己烷溶液)纯

化该油状物,得到2-氟乙基甲苯磺酸盐(13),为无色油状物(225mg,产率52%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ7.79(d,2H,J=8.5Hz),7.35(d,2H,J=8.6Hz),4.61(m,1H),4.51(m,1H),4.28(m,1H),4.22(m,1

H),2.45(s,3H)。

(((S)-1-羧基-5-(3-(2-(1-(2-氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基-

L-谷氨酸(RPS-042)。将叠氮化钠(10mg,150μmol)悬浮在2-氟乙基甲苯磺酸盐

(7.5mg,30μmol)的DMF(0.3mL)溶液中。将悬浮液在室温下搅拌过夜,然后过滤。向

滤液中加入炔(6)(0.9mg,1.83μmol)的DMSO(0.2mL)溶液。在单独的小瓶中,将

0.5MCuSO

4

(100μL)和1.5M抗坏血酸钠(100μL)混合5分钟,然后作为在DMF(100μL)中的溶液

转移至反应小瓶中。将反应在室温下搅拌60分钟,然后通过反相制备型

HPLC(12mL/min,0%B至100%B30分钟,随后100%B5分钟,λ=220nm,254nm)纯化。

将含有产物的峰冻干,分离出RPS-042,为白色粉末(0.8mg,产率75%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.64(s,1H),8.16(d,1H,J=8.1Hz),7.61(d,1H,J=7.8Hz),7.26(dd,1H,J

1

=8.3Hz,J

2

=7.3Hz),7.12(brs,1H),7.02(m,2H),6.33(d,1H,J=8.3Hz),6.31(d,1H,J=8.4Hz),4.97(m,1H),4

.86(m,2H),4.80(m,1H),4.10(m,2H),3.07(m,2H),2.25(m,2H),1.94(m,1H),1.70(m,2H),1.57(

m,1H),1.44(m,2H),1.32(m,2H).ESI(+)=552.4(M+H)

+

;ESI(-)=550.3(M-H)

-

。计算的质量:551.21。

(((S)-1-羧基-5-(3-(3-(1-(2-氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)-

L-谷氨酸(RPS-040)。通过与RPS-042相同的方法由炔(7)合成RPS-040,并分离为白

色粉末(产率82%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.52(s,2H),7.94(s,1H),7.32(m,2H),7.26(m,1H),6.32(m,2H),6.15(t,1H,J=5.2Hz),4.91(

t,1H,J=4.6Hz),4.82(t,1H,J=4.6Hz),4.77(t,1H,J=4.6Hz),4.71(t,1H,J=4.6Hz),4.08(m,2H),3.

07(d,2H,J

1

=12.4Hz,J

2

=6.8Hz),2.25(m,2H),1.91(m,1H),1.67(m,2H),1.54(m,1H),1.43(m,2H),1.30(m,2H).ESI(+)

=552.4(M+H)

+

.ESI(-)=550.3。计算的质量:551.21。

(((S)-1-羧基-5-(3-(4-(1-(2-氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)苯基)脲基)戊基)氨基甲酰基)-

L-谷氨酸(RPS-041)。通过与RPS-042相同的方法由炔(8)合成RPS-041,并分离为白

色粉末(产率50%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.57(s,1H),8.48(s,1H),7.70(d,2H,J=8.6Hz),7.47(d,2H,J=8.6Hz),6.35(d,1H,J=9.3Hz),

6.33(d,1H,J=9.3Hz),6.22(brs,1H),4.92(t,1H,J=4.7Hz),4.83(t,1H,J=4.7Hz),4.77(t,1H,J=4.7

Hz),4.72(t,1H,J=Hz),4.10(m,2H),3.10(m,2H),2.21(m,2H),1.93(m,1H),1.85(m,2H),1.63(m

,1H),1.43(m,2H),1.33(m,2H).ESI(+)=552.5(M+H)

+

;ESI(-)=550.3(M-H)

-

。计算的质量:551.21。

(((S)-1-羧基-5-(3-(2-(1-(2-氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)苯基)脲基)戊基)氨基

甲酰基)-L-谷氨酸(RPS-039)。通过与RPS-042相同的方法由炔(10)合成RPS-039,并

分离为白色粉末(产率34%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.30(s,1H),8.09(d,1H,J=9.7Hz),7.74(s,1H),7.16(d,1H,J=9.6Hz),6.95(t,1H,J=5.4Hz),6

.86(m,2H),6.32(m,2H),5.24(s,2H),4.90(t,1H,J=4.4Hz),4.78(m,2H),4.72(t,1H,J=4.4Hz),4.

10(m,2H),3.05(m,2H),2.25(m,2H),1.93(m,1H),1.71(m,2H),1.55(m,1H),1.40(m,2H),1.32(

m,2H).ESI(+)=582.4(M+H)

+

;ESI(-)=580.3(M-H)

-

。计算的质量:581.22。

(((S)-1-羧基-5-(3-(3-(1-(2-氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)苯基)脲基)戊基)氨基

甲酰基)-L-谷氨酸(RPS-043)。通过与RPS-042相同的方法由炔(11)合成RPS-043,并

分离为白色粉末(产率60%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.40(s,1H),8.25(s,1H),7.18(brs,1H),7.10(t,1H,J=8.1Hz),6.89(d,1H,J=8.1Hz),6.57(d,1

H,J=8.2Hz),6.31(m,2H),6.13(brs,1H),5.09(s,1H),4.87(t,1H,J=4.6Hz),4.76(m,2H),4.69(t,1

H,J=4.6Hz),4.08(m,2H),3.05(m,2H),2.24(m,2H),1.91(m,1H),1.69(m,2H),1.55(m,1H),1.4

0(m,2H),1.31(m,2H).ESI(+)=582.4(M+H)

+

;ESI(-)=580.2(M-H)

-

。计算的质量:581.22。

(((S)-1-羧基-5-(3-(4-(1-(2-氟乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)苯基)脲基)戊基)氨基

甲酰基)-L-谷氨酸(RPS-038)。通过与RPS-042相同的方法由炔(12)合成RPS-038,并

分离为白色粉末(产率77%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-

d6)δ8.27(s,1H),8.25(s,1H),7.30(d,2H,J=9.0Hz),6.91(d,2H,J=9.0Hz),6.34(m,2H),6.10(t,1

H,J=5.3Hz),5.09(s,2H),4.89(t,1H,J=4.5Hz),4.78(m,2H),4.71(t,1H,J=4.5Hz),4.10(m,2H),3

.06(m,2H),2.25(m,2H),1.93(m,1H),1.73(m,2H),1.60(m,1H),1.42(m,2H),1.32(m,2H).ESI(

+)=582.3(M+H)

+

;ESI(-)=580.3(M-H)

-

。计算的质量:581.22。

国际申请PCT/US2017/039710号中DCFPyL的合成

冷配体DCFPyL和前体三甲基铵盐修复基团(20)的合成根据以下文献中描述的程序

进

行:OlbergDE,ArukweJM,GraceD,HjelstuenOK,SolbakkenM,KindbergGM,CuthbertsonA

.OneStepRadiosynthesisof6-[

18

F]FluoronicotinicAcid2,3,5,6-TetrafluorophenylEster([

18

F]F-Py-TFP):ANewProstheticGroupforEfficientLabelingofBiomoleculeswithFluorine-

em.2010;53:1732-40和

ChenY,PallumbhatlaM,FossCA,ByunY,NimmagaddaS,SenthamizhchelvanS,etal.2-(3-{1-

Carboxy-5-[(6-[

18

F]Fluoro-Pyridine-3-Carbonyl)-Amino]-Pentyl}-Ureido)-PentanedioicAcid,[

18

F]DCFPyL,aPSMA-

ncerRes.2011;17:7645-53,各自通过引

用并入本文。

N,N,N-三甲基-5-((2,3,5,6-四氟苯氧基)-羰基)吡啶-2-氨基三氟甲磺酸盐(20)。标题化

合物分三步从6-氯烟酸中分离,为白色晶体(137mg,产率19%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ9.42(d,1H,J=2.2Hz),8.94(dd,1H,J

1

=8.7Hz,J

2

=2.2Hz),8.29(d,1H,J=8.7Hz),7.57(m,1H),3.76(s,9H).ESI(+)=329.3(M

+

-OTf)。计算的质量:329.09。

6-氟烟酸2,3,5,6-四氟苯酯(21)。标题化合物由三甲基铵盐(20)合成,为白色粉末

(2.5mg,产率14%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ9.11(d,1H,J=2.1Hz),8.59(dt,1H,J

1

=8.2Hz,J

2

=2.4Hz),7.15(dd,1H,J

1

=8.6Hz,J

2

=2.9Hz),7.10(m,1H)。

2-(3-{1-羧基-5-[(6-氟吡啶-3-羰基)-氨基]-戊基}-脲基)-戊二酸(DCFPyL)。标题化合

物由活性化的酯(21)分两步合成,为白色粉末(2.0mg,产率55%)。

1

HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.67(m,2H),8.38(m,1H),7.30(dd,1H,J

1

=8.6Hz,J

2

=2.6Hz),6.33(m,2H),4.08(m,2H),3.26(m,2H),2.25(m,2H),1.93(m,1H),1.72(m,2H),1.58(m

,3H),1.36(m,2H).ESI(+)=499.4(M+H)

+

。计算的质量:498.21。

国际申请PCT/US2017/039710号的化合物的放射合成

一般的方珐。除非另有说明,否则所有溶剂和试剂均购自SigmaAldrich并且具有试

剂级质量。所有反应均在烘箱干燥的玻璃器皿中进行。使用TR19回旋加速器

(AdvancedCyclotronSystems,Inc.)通过

18

O(p,n)

18

F转化辐射H

2

18

O(RotemIndustries)获得氟-18。轰击结束活动通常为5.55-9.25GBq(150-250mCi)。

在具有双UV-Vis检测器和NaI(Tl)检测器(Bioscan)的双泵

VarianHPLC(AgilentTechnologies)上进行分析型和半制备型HPLC。溶剂A是

0.01%TFA的H

2

O,以及溶剂B是0.01%TFA的90:10v/vMeCN:H

2

O。半制备型HPLC在BondapakC187.8x300mm

柱(Waters)上进行,而分析型HPLC在SymmetryC184.6x50mm

柱(Waters)上进行。在220nm和280nm监测UV吸收光谱。使用15%B的等度溶剂

混合物以4mL/min的流速进行半制备型HPLC。分析型HPLC通常使用以下梯度以

2ml/min的流速进行:0%B0-1分钟,0-100%B1-8分钟,100-0%B8-10分钟。将所有放

射化学产率校正至在合成开始时测量的[

18

F]氟化物活性。报道的反应条件代表使用手动放射合成获得的最高产率。

国际申请PCT/US2017/039710号的示例性

18

F化合物的放射合成

下面的方案4给出了用于国际申请PCT/US2017/039710号的某些示例性

18

F化合物的代表性合成方案。具体的程序细节在此之后。

方案4.

2-叠氮基乙醇(14)。将溴乙醇(250mg,2.0mmol)溶解在H

2

O(7mL)中。加入叠氮化钠(195mg,3.0mmol)的H

2

O(3mL)溶液,将反应混合物在室温下搅拌4小时,然后在80°C下搅拌16小时。然后

将反应冷却至室温并用EtOAc萃取。合并有机层,用MgSO

4

干燥,过滤并减压浓缩,得到2-叠氮基乙醇(14),为透明液体(149mg,产率86%收率)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ3.88(t,2H,J=5.1Hz),3.39(t,2H,J=5.1Hz),3.14(brs,1H)。

2-叠氮基乙基甲苯磺酸盐(15)。将对甲苯磺酰氯(394mg,2.07mmol)的CH

2

Cl

2

(5mL)溶液加入到2-叠氮基乙醇(149mg,1.72mmol)的CH

2

Cl

2

(10mL)溶液中。加入三乙胺(0.48mL,3.44mmol),并将反应在室温下,在Ar下搅拌5

小时。然后依次用1MHCl、H

2

O和饱和NaCl溶液洗涤反应。用MgSO

4

干燥有机层,过滤并减压浓缩,得到浅色油状物。通过硅胶柱层析(33%EtOAc的己烷

溶液)纯化该油状物,得到2-叠氮基乙基甲苯磺酸盐(15),为无色油状物(204mg,产率

49%)。

1

HNMR(500MHz,CDCl

3

)δ7.74(d,2H,J=8.2Hz),7.29(d,2H,J=8.1Hz),4.08(t,2H,J=5.1Hz),3.41(t,2H,J=5.1Hz),2.39(s

,3H)。

2-[

18

F]氟乙基叠氮化物(16)。将没有载体添加的[

18

F]氟化物捕获在预活化的Sep-PakQMA柱(Waters)上,并用1mL含有2.7mgK

2

CO

3

和4mgKryptofix-222的80%v/vMeCN/H2O溶液洗脱。将溶液用MeCN(2x0.5mL)在

100°C下共沸干燥10分钟。向干燥的[

18

F]氟化物中加入2-叠氮基乙基甲苯磺酸盐(15)(6mg)的MeCN(300μL)溶液。所得溶

液在80°C下搅拌10分钟,得到2-[

18

F]氟乙基叠氮化物。通过在130°C下加热小瓶并将2-[

18

F]氟乙基叠氮化物捕获在含有冷却至0°C的100μLDMF的小瓶中,通过蒸馏纯化2-[

18

F]氟乙基叠氮化物。

国际申请PCT/US2017/039710号的代表性的

18

F化合物的示例性合成。将0.5MCuSO

4

(50μL)和1.5M抗坏血酸钠(50μL)在DMF(100μL)中的预混合溶液加入到含有2-[

18

F]氟乙基叠氮化物溶液的小瓶中,然后加入在DMSO(100-150μL)中的1mg炔烃前体

(6-8;10-12)。反应在100°C下搅拌20分钟。然后将其冷却至室温,用2mLH

2

O稀释并通过0.45μm尼龙注射过滤器(Cole-Parmer)过滤。过滤器用1mLH

2

O洗涤,将其加入滤液中。通过半制备反相HPLC(4mL/min;0-100%B;30min)纯化滤

液,并收集对应于

18

F标记的三唑的峰,用H

2

O稀释并通过预活化的Oasis

TM

固相萃取柱(Waters)。用EtOH洗脱保留的活性,并用0.9%NaCl溶液稀释,直至乙醇

浓度小于5%v/v,且放射性浓度最小为74MBq/mL。合成、纯化和最终配制在合成

开始后105分钟内完成。使用优化的等度HPLC纯化方法(4mL/min;15%B;30min)来

分离在20-40%衰变校正放射化学产量、大于99%放射化学纯度和比活度高达

391GBq/μmol中的[

18

F]RPS-040和[

18

F]RPS-041。

[

68

Ga]Ga-PSMA-HBED-CC。标题化合物根据以下文献中描述的程序产生:Amor-

CoarasaA,SchoendorfM,MeckelM,VallabhajosulaS,hensiveQualityContr

oloftheITGGe-68/Ga-68GeneratorandSynthesisofGa-68-DOTATOCandGa-68-PSMA-

ed.2016Apr21(PMID:27103024),通过引用并入本

文。具体地,用4mL0.05MHCl洗脱1.85GBq

68

Ga/

68

Ge发生器(ITG),并获得

68

GaCl

3

作为185-222MBq/mL溶液。从该储备溶液中取1mL(含有约185MBq),将其与5μL

的1mg/mLPSMA-HBED-CC(ABX)在H

2

O中的溶液在95°C下混合。通过加入20μL的3NNaOAc溶液引发反应,并在

Thermomixer上继续加热至95°C持续20分钟。然后使其通过预活化的Sep-

PakOasis

TM

柱(Waters),并用H

2

O洗涤柱。将[68Ga]Ga-PSMA-HBED-CC在10%v/vEtOH的盐水溶液中洗脱,并稀

释至最终浓度为约100MBq/mL。衰变校正的放射化学产率大于95%,放射化学纯度

大于99%。

[

18

F]DCFPyL。在50μL的100μg/mLKF的H

2

O溶液和4mgkryptofix-222的存在下,在2mLH

2

18

O中的10.73GBq(290mCi)[

18

F]氟化物与MeCN在100°C下共沸干燥。向干燥的混合物中加入9mg6-三甲基铵盐

(20)的1mLMeCN溶液,并将反应在40°C下搅拌70分钟。将反应混合物稀释至

10mL并通过预活化的Sep-Pak二氧化硅柱(Waters)。将洗脱液在60°C下蒸发至干

燥。向干燥的混合物中加入在10μLMeCN、5μLNEt3和1mLCH

2

Cl

2

中的1mg二叔丁基(((S)-6-氨基-1-(叔丁氧基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酰基)-L谷氨

酸酯(1)。将反应在40°C下搅拌20分钟,然后加入在10μLMeCN和5μLNEt3中的另

外1mg(1)。将反应再搅拌30分钟,然后蒸发溶剂,将粗产物溶于100μLTFA中,并在

40°C下搅拌20分钟。真空蒸发挥发物,将粗渣溶于H

2

O,并通过半制备HPLC(2mL/min,10分钟梯度)纯化。收集含有产物的峰,用H

2

O稀释并捕获在预活化的Sep-PakOasis

TM

柱(Waters)上。用600μLMeCN洗脱活性,并在100°C下真空浓缩。将粗渣溶于

200μL0.9%NaCl溶液中。总合成时间为230分钟,衰变校正放射化学产率为0.9%,放

射化学纯度大于96%,且比活性大于35GBq/μmol。

*****

虽然已经说明和描述了某些实施方案,但是本领域普通技术人员在阅读前述的说明

书后,能够对如本文所述的本技术的化合物或盐、其药物组合物、其衍生物、其前

药、其代谢物、其互变异构体或其外消旋混合物进行改变、等同替换和其他类型的

改变。上文所述的每个方面和实施方案也能够包括如关于任何或所有其他方面和实

施方案所公开的这样的变化或方面,或与其合并。

本技术也不限于本文所述的特定方面,其旨在作为本技术的各个方面的单个说明。

在不脱离本发明的精神和范围的情况下,能够对本技术进行许多修改和变化,这对本

领域技术人员来说是显而易见的。除了本文列举的那些之外,从前面的描述中在本

技术范围之内的功能等同方法对于本领域技术人员是显而易见的。这些修改和变化

旨在落入所附权利要求的范围内。应理解,本技术不限于特定的方法、试剂、化合

物、组合物、标记的化合物或生物系统,它们当然能够变化。还应理解,本文使用的

术语仅用于描述特定方面的目的,而不是限制性的。因此,本说明书仅旨在被认为是

示例性的,其中本技术的广度、范围和精神仅由所附权利要求、其中的定义及其任

何等同物表示。

本文说明性地描述的实施方案可以适当地在缺少本文未具体公开的任何要素、限制

的情况下实施。因此,例如,术语“包含”、“包括”、“含有”等应当被广泛地理解而不

受限制。另外,本文所使用的术语和表达已被用作描述的而非限制的术语,并且无意

使用这些术语和表达来排除所示和所述特征的任何等同物或其部分,但应当认识的

是,在要求保护的技术的范围内可以进行各种修改。另外,短语“基本上由......组成”将

被理解为包括具体叙述的那些元素和那些不会实质上影响所要求保护的技术的基本

和新颖特征的那些附加元素。短语“由......组成”排除了未指定的任何元素。

另外,在根据马库什群组描述本公开的特征或方面的情况下,本领域技术人员将认识

到,本公开也因此以马库什群组的任何单个成员或成员的子群的形式进行了描述。

落入通用公开内容中的每个较窄物种和亚属群组也构成本发明的一部分。这包括带

有从该属中移除任何主题的附带条件或否定限制的本发明的一般性描述,无论是否

在本文中具体叙述了被切除的材料。

如本领域技术人员将理解的,出于任何和所有目的,特别是在提供书面描述方面,本文

公开的所有范围还包含任何和所有可能的子范围及其子范围的组合。任何列出的范

围能够容易地被识别为充分描述并且使得相同的范围能够被分解为至少相等的一半、

三分之一、四分之一、五分之一、十分之一等。作为非限制性实施例,本文讨论的

每个范围能够容易地分解为下三分之一、中三分之一和上三分之一等。如本领域技

术人员还将理解的,诸如“多达”、“至少”、“大于”、“小于”等的所有语言包括所述的

数字并且指的是能够随后分解为如上所讨论的子范围的范围。最后,如本领域技术

人员将理解的,范围包括每个单独的成员。

本说明书中提及的所有出版物、专利申请、授权专利和其他文献(例如,期刊、文章

和/或教科书)均通过引用并入本文,如同每个单独的出版物、专利申请、授权专利或

其他文献被具体地并单独地指出以通过引用整体并入。通过引用并入的文本中含有

的定义被排除在它们与本公开中的定义相矛盾的范围之外。

本技术可以包括但不限于以下文字段落中所述的特征和特征组合,应理解的是,以下

段落不应被解释为对所附权利要求的范围的限制或要求所有这样的特征必须被包括

在这样的权利要求中:

A.一种本文所述的任何实施方案的

18

F标记的肽配体,例如本文所述的任何实施方案的

18

F标记的生长抑素受体激动剂、本文所述的任何实施方案的

18

F标记的蛙皮素受体激动剂、本文所述的任何实施方案的

18

F标记的seprase结合化合物、以及如本文所述的式I、IA、IB、II、IIA、III、IIIA、

IV、IVA、V、VA、VI和VIA中的任何一个或多个的任何实施方案的化合物。

B.一种用于制备段落A的

18

F标记的肽配体的中间体,其中该中间体是本文所述用于制备本技术的任何

18

F标记的肽配体的实施方案的。

C.一种组合物,其包含段落A的

18

F标记的肽配体和药学上可接受的载体。

D.一种药物组合物,其用于检测表达(例如,过表达)生长抑素受体、蛙皮素受体、

seprase、或其任何两种或更多种的组合的哺乳动物组织,该组合物包含有效量的段

落A的

18

F标记的肽配体和药学上可接受的载体。

E.根据段落D所述的药物组合物,其中所述哺乳动物组织包含产生生长激素的肿瘤、

神经内分泌肿瘤、垂体瘤、分泌血管活性肠肽的肿瘤、肺小细胞癌、胃癌组织、胰

腺癌组织、神经母细胞瘤和转移性癌症中的一种或多种。

F.一种方法,包括:向对象施用段落A所述的

18

F标记的肽配体;以及在所述施用之后,检测正电子发射、来自正电子发射和湮灭的γ

射线、以及由于正电子发射引起的切伦科夫辐射中的一种或多种。

G.根据段落F所述的方法,其中所述方法包含向所述对象施用有效量的

18

F标记的肽配体。

H.根据段落F或段落G所述的方法,其中当向对象施用时,所述对象被怀疑患有表达

(例如,过表达)生长抑素受体、蛙皮素受体、seprase、或其任何两种或更多种的组合

的哺乳动物组织。

I.根据段落J所述的方法,其中所述哺乳动物组织包括产生生长激素的肿瘤、神经内

分泌肿瘤、垂体瘤、分泌血管活性肠肽的肿瘤、肺小细胞癌、胃癌组织、胰腺癌组

织、神经母细胞瘤、以及转移性癌症中的一种或多种。

J.根据段落F-I中的任一项所述的方法,其中施用所述化合物包括肠胃外施用。

K.一种形成段落A所述的

18

F标记的肽配体的方法,其中该方法包括在溶剂的存在下使段落B的中间体、铜盐

和式XX的叠氮化物接触

其中χ在每次出现时独立地为1或2。