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2024年4月23日发(作者：oracledelete表数据恢复)
人乳头状瘤病毒病原体检测(流式荧光法)标准操作规程
一、检验目的
人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)病原体检测用于临床尖锐湿疣体表面脱落细胞，
妇女宫颈细胞及宫颈粘液标本中26种HPV病毒DNA的分型检测。可作为HPV感染的辅助诊断。
二、适用范围
1. 适用于下生殖道分泌物、宫颈脱落细胞等样本的采集，接受，处理，检测及报告。
2. 适用仪器：ABI7000 PCR扩增仪、LIFE EXPRESS基因扩增仪、Luminex200流式分析仪。
三、方法原理
本试剂盒系由人乳头状瘤病毒(HPV)核酸提取试剂、HPV杂交检测试剂等组成。用Chelex-100树
脂法抽提宫颈脱落细胞基因后，采用多重PCR技术对DNA进行扩增，并以流式荧光杂交法对扩增
产物进行检测分析，判定样品中是否存在HPV。多重PCR可有效扩增HPV16、18、31、33、35、
39、45、51、52、56、58、59和66共13种高危亚型，此外还可以有效扩增HPV6、11、40、42、
44、53、54、55、56、61、68、73、83等亚型。微球杂交液中包含多种荧光编码微球，每种荧光编
码微球的表面都共价交联有寡核苷酸探针，在杂交过程中探针特异性识别并结合PCR产物中的靶序
列，再经过和荧光素反应后形成微球－探针－扩增产物－荧光素的复合物，经Luminex流式分析仪
阅读时，可获得该复合物的微球编码及荧光强弱信号，最后经过透景HPV专用的分析软件判定相应
的检测结果。
四、性能指标
1. 检测灵敏度：本试剂盒的最低检测限为10-20拷贝(0.02ng/ml)
2. 检测特异性：阳性参比品符合率：试剂盒对26种HPV亚型的阳性参比品进行2次平行坚持
测，结果均为阳性。阴性参比品符合率：试剂盒对正常人基因组参比品进行2次平行检测，结果均
为阴性。
3. 检测重复性：分别对HPV16、HPV18、HPV31、HPV45和 HPV33共5种高危亚型阳性参比品进
行10次平行检测，结果一致且准确。
五、标本收集
1. 标本类型：下生殖道分泌物、宫颈脱落细胞等，但未按保存条件保存的标本不宜作为检测标
本。
2. 标本留取：
2.1 检查前准备：
2.1.1 三天内不使用阴道内药物或对阴道进行冲洗。
2.1.2 24小时内不应有性行为。
2.1.3 检查应在非月经期内进行。
3. HPV DNA具体取样步骤：由医生以窥阴器或阴道张开器暴露宫颈。将宫颈刷置于宫颈口，轻
轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5圈。慢慢取出官颈刷，将其放入标有病人编号的取样管中，取样管
内已加有专用细胞保存液，拧紧瓶盖。
4. 标本保存：如若不能马上送检样本，请于4℃保存，请在2个星期之内进行检测。可在-20℃
长期保存。
5. 标本容器：盛放标本的容器必须是洁净的厂家提供的配套标本保存管且其内要有足够的保存
液。
6. 标本外送：如涉及到需要外送的标本，必须以规定的容器存放并密封，并根据邮寄规则和要
求进行包装，运送时还要放入冰袋(2-8℃)或干冰(-10℃)由专人运送至指定地点指定接收人。
7. 拒收标本：凡与1-4所述内容不符的标本，检验人员应向临床或就诊者说明拒收标本的原因，
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