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2024年12月29日发(作者：js混淆压缩)
磁珠法多糖多酚植物组织基因组DNA提取试剂盒
MagBeads Polysaccharide & Polyphenol Plant Genomic DNA Extraction Kit
【目 录 号】PTDE-6005、PTDE-6030；
【运输条件】2~25℃；
【保存条件】磁珠分散液、β-巯基乙醇2~8℃；蛋白酶K -20℃；其它组分室温保存；
【试剂盒组成】
Kit Component
试剂盒组成
① PTDE-Buffer
裂解液
② PTDE-Binding Buffer
结合液
③ PTDE Magnetic Beads
磁珠悬浮液
④ Wash Buffer
清洗液
⑤ Proteinase K
蛋白酶K
⑥ β-ME
β-巯基乙醇
⑦ Dealcohol Buffer
除醇液
⑧ Elute Buffer
洗脱液
PTDE-6005
（50T）
21mL
PTDE-6030
（300T）
125mL
12mL 70mL
(使用前加入18mL异丙醇) (使用前加入105mL异丙醇)
4mL
30mL
1mL
42μL
20mL
5mL
24mL
180mL
6mL
250μL
120mL
30mL
【注意事项】
1. 使用前请检查裂解液（组分①）和结合液（组分②）是否出现结晶，如有结晶请置于
65℃温浴至重新溶解完全；
2. 初次使用全新试剂盒前，请按照结合液（组分②）标签标注量加入异丙醇，稀释备用；
3. 磁珠悬浮液（组分③）不可反复冻融或离心，使用前需充分摇匀；
4. 蛋白酶K（组分⑤）于-20℃长期保存，避免反复冻融；融化后4℃保存，并尽快使用；
5. 请仔细阅读本说明书，并按照操作指南建议操作。
【产品简介】
本试剂盒采用针对富含多糖多酚植物组织进行杂质去除的特殊磁珠，配合高性能缓冲液
体系，可从各种富含多糖多酚植物组织样本中高质量的分离纯化基因组DNA。
特殊技术包埋的磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力，而当条件改变时，磁珠会
释放所吸附的核酸，从而达到快速分离纯化核酸的目的。提取所得的基因组DNA产物片段大、
纯度高、质量稳定可靠，尤其适合高通量仪器自动化提取，特别是本公司生产的各类型号自
动化核酸提取仪或工作站。使用本试剂盒纯化所得核酸产物可适用于各种常规分子生物学下
游实验，如：酶切、 PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测和高通量
测序等。
【试剂盒说明】
样本类型
各种类型富含多糖多酚植物组织
最适提取量
20~100mg
核酸得量范围
3~25μg
【自备仪器及耗材】
研钵&研磨棒(或者研磨机、匀浆机)、水浴锅、涡旋混合仪、高速离心机、EP管（1.5mL
或2.0mL）、EP管配套用磁力架、核酸提取仪（仪器自动版操作步骤需准备）。
【自备试剂】
液氮、乙醇(80%, v/v)、异丙醇、RNase A溶液(100mg/mL，分散液10mM Tris-HCl, 1mM
EDTA, pH值8.0)。
【仪器自动法版操作步骤】
该方法配合磁棒法核酸提取仪使用，以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例，可同
步完成32份植物样本提取工作。
1. 准备96孔板
样品位
试剂
1
、
7 2
、
8 3
、
9 4
、
10
80%
乙醇
600μL
5
、
11
除醇液
400μL
6
、
12
洗脱液
100μL
磁珠悬浮液
80
μ
L
结合液
550
μL
80%
乙醇
600
μ
L
清洗液
600
μ
L
（已加入异丙醇）
参照下表用量，向96孔板相应孔位中分别加入对应试剂：
注：1）每次
吸取
磁珠悬浮液前尽量摇晃均匀；2）为提高效率建议使用排枪。
2. 组织样本前处理和裂解
取适量(≤100mg)植物组织样本，液氮研磨至粉末状，尽量完全转移至EP管中。加入400μL
裂解液、0.8μL β-巯基乙醇和20μL蛋白酶K，涡旋振荡1~3min至混合均匀，呈云雾状。65℃
温浴15min，每隔5~10min上下颠倒混匀一次。
注：
1
）若样本量大于
100mg
，但不超过
400mg
，需增加裂解液使用量，可按照每增加
100mg
组织样本
增加
150μL
裂解液使用量，并延长裂解时间，其余试剂用量不变；
2
）若样本个数较多，可预先将蛋白酶
k
、
β-
巯基乙醇和裂解液提前混合备用；
3）
如需去除
RNA
，需在加入蛋白酶
K
之前额外加入
5μL RNase A
溶液。
3. 上机提取
将裂解完毕样本室温（勿低于15℃）、13000rpm离心10min，吸取200~400μL上清液转
移到在96孔板的2/8列孔位。将96孔板置于ETP-300型核酸提取仪中，并插入磁棒套；打开仪
器操作软件，调用“植物组织DNA提取实验方法”程序，点击“运行”执行程序。
“植物基因组
DNA
提取程序”各参数设置如下，如机器和说明书不一致，请以说明书为准：
步骤编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
孔位
1
2
1
2
1
3
4
5
6
3
运行类型
转移磁珠
DNA结合
清洗1
DNA结合
清洗1
80%乙醇
80%乙醇
除醇
洗脱
弃磁珠
振荡时间
(s)
1
180
180
300
180
180
120
0
360
15
分离时间
(s)
5
5
5
10
5
5
5
5
30
0
挥发时间
(s)
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
振荡幅度
5
4
5
4
5
5
5
3
2
5
振荡强度
弱
中
强
中
强
强
强
强
中
强
一组温度
(℃)
0
0
0
0
0
0
0
0
60
0
二组温度
(℃)
0
0
0
0
0
0
0
0
60
0
三组温度
(℃)
0
0
0
0
0
0
0
0
60
0
四组温度
(℃)
0
0
0
0
0
0
0
0
60
0
10
4. 核酸转移
程序运行完毕，取下96孔板，将洗脱液转移至干净的EP管或者PCR板中，提取过程完毕，
此时可以弃去96孔板。
【手动法版操作步骤】
1. 组织样本前处理和裂解
参照【仪器自动版操作步骤】中步骤2进行操作。
2. 核酸结合
将裂解完毕EP管室温（勿低于15℃）、13000rpm离心10min，吸取200~400μL上清液
转移至另一只干净EP管中，加入80μL磁珠悬浮液以及550μL结合液（已加异丙醇），颠倒混
合均匀。将EP管高速涡旋振荡6min，使磁珠与核酸充分结合，振荡完毕静置2min。
3. 磁性分离
将EP管置于磁力架上静置20s至磁珠吸附完全；如果EP管内盖有磁珠，可保持EP管在
磁力架上，整体上下颠倒2~3次至磁珠被完全吸附。保持EP管固定于磁力架上，用移液枪吸
弃上清液，期间避免接触磁珠。
4. 清洗1
向EP管中加入600μL清洗液，将EP管从磁力架上取下，用移液枪吹散磁珠，涡旋震荡
2min，磁性分离（参照步骤3操作）。
5. 清洗2
使用600μL 80%乙醇，参照步骤4操作2次。
6. 除醇
将除尽上清夜后的EP管保持在磁力架上，切勿取下，加入800μL除醇液，迅速手动摇动
EP管冲洗磁性吸附的磁珠表面，并快速弃去除醇液。
注：若植物组织糖类或多酚类物质含量较高，此时
EP
管壁上会吸附少量特异性结合了杂质的磁珠，尽量
弃去除醇液和管壁上的除杂磁珠。
7. 洗脱
取出除醇完毕的EP管，加入100μL洗脱液（或去离子水）至管底，小心吹散磁珠，切勿
溶解或吸取到管壁上的除杂磁珠。将重悬后磁珠转移至另一干净EP管中，65℃温浴5min，然
后涡旋洗脱2min，确保磁珠与核酸完全洗脱解离。
注：洗脱液要求大于
50μL
，
100~200μL
较好，洗脱液体积较少时会影响核酸得率。
8. 核酸转移
洗脱完毕后，将EP管置于磁力架上静置20s至磁珠吸附完全，用移液枪将洗脱液转移至
另一干净EP管中，提取过程完毕，此时可弃去磁珠。
（0702修订版）
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